H2O2诱导的视网膜色素上皮细胞的凋亡过程中AChE的表达

来源 :南昌大学医学院 南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zane11th
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目的:探讨氧化应激诱导视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡过程中乙酰胆碱酯酶(AChE)的变化及其可能发挥作用的分子机制。方法:培养人RPE细胞株ARPE-19,分为H2O2氧化组、H2O2未处理组(对照组)和氧化保护组(加入EGCG)。MTT法观察不同浓度H2O2对ARPE-19细胞活性的影响;免疫荧光检测正常视网膜AChE的表达;分别采用TUNEL染色和Western印迹法检测高浓度H2O2作用2小时后AChE和PARP-1的表达变化。采用t检验统计分析不同浓度H2O2作用不同时间的结果。结果: H2O2>500μmol/L时,处理2h后AChE的表达开始升高,选择1000μmol/L为后续实验浓度。H2O2作用RPE细胞2h后,MTT显示细胞活性随着H2O2浓度升高而下降,Western印迹法检测到AChE和PARP的表达量明显上升。免疫荧光AChE染色阳性。此外,加入EGCG后,细胞活力从31.20%±3.90%升高到70.23%±12.96%。结论:H2O2可以导致RPE细胞凋亡,RPE细胞凋亡过程中AChE的表达升高。
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