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目的本文通过建立咀嚼负荷降低的动物实验模型,探讨咀嚼负荷的改变对幼兔髁突软骨发育和髁突软骨下骨超微结构的影响,研究软骨细胞及软骨下骨中BrdU标记的敏感性。方法实验一选取出生10d龄的32只幼兔喂食固体颗粒饲料,实验1组每次处死前的1周,每天每只幼兔注射BrdU50mg/kg,实验2组每天每只兔子注射BrdU50mg/kg,连续2周后停止注射,分别于实验开始后的第2、4、6、8周,每组处死4只。实验二、三、四选取10d龄的32只幼兔,随机分为喂食固体硬食组和喂食粉末软食组。连续2周每天每只腹腔注射BrdU (50mg/kg),在2、4、6、8周时每组处死4只幼兔,HE观察组织形态学变化测量软硬组髁突厚度变化,免疫组化检测BrdU、Ihh、PTHrP表达,显微CT观察软骨下骨的变化。结果1、通过改变食物软硬程度能够建立稳定地幼兔早期髁突软骨及软骨下骨咀嚼负荷不同的动物模型。2.50mg/kgBrdU连续注射1周既能有效标记,又能避免试剂的浪费。对于幼兔长期检测跟踪髁突软骨干细胞的示踪标记时,本次实验中BrdU并不能长期保留。3、咀嚼负荷的变化可以引起幼兔髁突软骨层厚度的改变。髁突软骨前部厚度硬食组明显高于软食组,在中部无明显差异,髁突软骨后部厚度软食组高于硬食组。4、咀嚼负荷的变化导致BrdU的敏感性差异。BrdU免疫组化染色显示,发育期髁突软骨各层及软骨下骨骨髓腔内均有BrdU阳性标记,前部的增殖层表送最显著。第2周,硬食组在前、中、后3个部位的BrdU阳性率都高于软食组；第6周,软食组的中、后部位的阳性率高于硬食组；第8周,软硬组均检测不到阳性细胞。5、 Ihh/PTHrP对软骨的增殖起重要调节作用,在咀嚼负荷降低的模式中,两者启动分化的时机存在一定的先后顺序。Ihh的表达在第2周时首先增高,随后第4周出现PTHrP表达的一个高峰期6、咀嚼负荷的改变可引起幼兔髁突软骨下骨ROI区域的超微结构变化。第4周软食组的骨小梁厚度(Tb.Th)、骨体积(BV)、骨小梁数量(Tb.N)相比较硬食组有显著性降低,骨小梁分离度(Tb.Sp)较硬食组显著升高(P<0.05),BrdU阳性细胞数定性分析硬食组多于软食组。第8周,各测量指标在两组间均无统计学差异,BrdU阳性细胞数定性分析软食组多于硬食组。结论软食组在低咀嚼力刺激下,幼兔髁突软骨细胞增殖启动较慢。适当的咀嚼压力能促进髁突软骨细胞的增殖,咀嚼负荷对下颌髁突软骨下骨超微结构也有一定的影响,两者同时还受基因等内部因素影响。