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目的观察酶育牛黄(calculus bovis cultivated by glucuronidase, CBCG)在体内对肉瘤S180的抗肿瘤作用、免疫调节作用以及对环磷酰胺(cyclophosphamide, CTX)的增效减毒作用并初步探讨CBCG抗肿瘤分子机制。方法肉瘤S180荷瘤小鼠随机分为7组：模型组(给予牛黄溶媒，灌胃给药)、CBCG高、中、低剂量组(2g/kg、1g/kg、0.5g/kg,灌胃给药)、天然牛黄(calculus bovis, NCB)组(1g/kg,灌胃给药)、CTX组(0.02g/kg，腹腔注射)、联合用药组(CTX0.02g/kg+CBCG1g/kg,腹腔注射、灌胃给药)。连续给药10天，每天以游标卡尺量取肿瘤长、短径，绘制肿瘤生长曲线。第11天心脏取血，全血计数仪测定血白细胞、血小板、红细胞及血红蛋白含量；剩余血液离心，留取上层血浆，ELISA法检测血浆IL-2、TNF-α含量。取血后处死小鼠剥取肿瘤组织，称重并计算抑瘤率；留取部分肿瘤组织，常规包埋，切片HE染色，镜下观察肿瘤组织形态学变化；提取肿瘤组织总蛋白，Western blot法检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白PTEN、AKT、BAX、BCL-2和P53的表达。留取胸腺和脾脏，计算胸腺指数、脾指数。以荷瘤小鼠脾细胞为效应细胞，肉瘤S180腹水瘤细胞为靶细胞，MTT法检测各组小鼠脾CTL杀伤活性。结果1. CBCG的抗肿瘤作用：与模型组相比，各用药组肿瘤生长缓慢，以CTX和联合用药组最为明显，CBCG各组呈现出剂量依赖，NCB组与CBCG高剂量组疗效接近。除CBCG低剂量组无明显抑制作用，其余用药组均能明显抑制肿瘤生长（P<0.001）。组织形态学观察显示，与模型组相比，各用药组细胞核固缩，胞浆增多，出现核分裂、空洞现象。CBCG高剂量组、CTX组和联合用药组出现大片坏死区域，NCB组细胞坏死、凋亡程度介于CBCG高、中剂量组之间。2. CBCG的免疫调节作用：与模型组相比，各牛黄组脾、胸腺指数有所增加，其中CCBG高剂量组、天然牛黄组差异有统计学意义（P<0.001，P<0.05）。与模型组比较，各组IL-2含量升高，TNF-α含量降低。CBCG高剂量组和天然牛黄组IL-2含量明显增加（P<0.01，P<0.05），CBCG低剂量组TNF-α含量明显降低（P<0.05）。各组之间CTL杀伤活性变化不明显，差异无统计学意义。3. CBCG抗肿瘤分子机制：与模型组相比，用药组肿瘤组织PTEN、BAX、P53含量增加；P-AKT（Thr308）、P-AKT（Ser473）、BCL-2含量降低；CBCG高剂量组、NCB组、CTX组和联合用药组BCL-2/BAX比值显著降低（P<0.001）。联合用药与阳性对照比较BCL-2/BAX比值进一步下降，差异有统计学意义（P<0.01）。4. CBCG对CTX的减毒作用：各组与CTX组比较，全血白细胞、血小板计数明显高（P<0.001）。联合用药后，CBCG能在一定程度上逆转CTX造成的血白细胞、血小板降低，差异具有统计学意义（P<0.01，P<0.05）；并能改善其造成的免疫器官抑制，提高脾和胸腺指数（P<0.05）。结论CBCG具有抗肿瘤和一定免疫调节作用，并能减轻CTX的毒性。其抗肿瘤作用机制可能与调节PI3K/AKT信号通路有关。