论文部分内容阅读
目的由于巨细胞病毒感染可导致机体免疫功能下降,因此我们通过临床与动物实验共同研究探讨围生期与先天性巨细胞病毒感染合并肝脏损伤对乙肝疫苗免疫应答效果的影响及其发生机制。方法临床实验方法选取我院巨细胞病毒感染患儿41例,平均年龄1月,所有患儿均于生后24小时内接种乙肝疫苗。抽取空腹静脉血检测血清肝功生化；检测结果有异常者归为A组,即巨细胞病毒感染合并肝损伤组,共20例。检查结果无明显异常者归为B组,即巨细胞病毒感染无肝损伤组,共19例。选取健康小婴儿,归为C组,即正常对照组,共20例。应用化学发光法检测HCMV-IgM抗体及抗HBsAb滴度,荧光定量PCR技术检测外周血淋巴细胞HCMV-DNA;流式分析技术检测外周血淋巴细胞亚群。动物实验方法取8-9周龄雌性SPF级大鼠30只,见栓孕鼠随机分为实验组和对照组,实验组20只,对照组10只,于见栓后第2-5天分别腹腔内接种HCMV-AD169株病毒悬液0.1ml/只(6.0logTCID50/ml),对照组腹腔内接种等量的人胚肺细胞上清液,待其分娩后,所有新生鼠于生后24小时内双后肢肌内接种乙肝疫苗,5u g/只。所有幼鼠于生后三周处死,收集血清检测HCMV-IgM和肝功生化指标,留取肝脏做病理切片行HE染色。HCMV-IgM阳性、肝功尘化结果或(和)肝脏HE染色结果异常者归为A组,即巨细胞病毒感染合并肝损伤组,共81只；HCMV-IgM阳性、肝功生化结果和肝脏HE染色结果均无异常者归为B组,即巨细胞病毒感染无肝损伤组,共81只；正常对照组归为C组,共83只。应用ELISA方法检测血清中抗HBsAb滴度、血清及肝组织中IL-2、IL-6的水平。结果临床实验结果1.抗HBsAb(?)商度：A组：抗HBsAb滴度最低,检测值为3.01±4.05mIU/ml,与B组及C组相比较有统计学意义(P<0.01),B组：抗HBsAb滴度为220.45±3.17mIU/ml,与C组相比较无统计学意义(P>0.05)；C组：抗HBsAb滴度最高,检测值为223.34±3.73mIU/ml.2.细胞免疫功能指标：A组：CD3+、CD4+、CD19+、NK细胞含量降低,CD8+细胞含量升高,CD4/CD8比值下降,与B组及C组比较有统计学意义(P<0.05),B组与C组相比较无统计学意义(P>0.05)。动物实验结果1.抗HBsAb滴度：A组：抗HBsAb滴度最低,检测值为0.47±0.09U/ml,与B组及C组相比较有统计学意义(P<0.01)；B组：抗HBsAb (?)商度介于A组与C组之间,检测值为0.70±0.07U/ml,与C组相比较无统计学意义(P>0.05),C组：抗HBsAb滴度最高,检测值为0.73±0.09U/ml。2.血清IL-2和IL-6的水平：A组：血清IL-2的水平最低,检测值为14.51±8.07ug/1,IL-6的水平最高,检测值位为7.25±3.77ng/1,与B组及C组相比较有统计学意义(P<0.01);B组：血清IL-2和IL-6的水平介于A组及C组之间,检测值为18.78±8.00ug/l和2.88±1.26ng/l,与C相比较无统计学意义(P>0.05)；C组：血清IL-2的水平最高，检测值为19.14±6.09ug/l,IL-6的水平最低,检测值为2.69±0.46ng/l。3.肝组织IL-2和IL-6的水平：八组：肝组织中IL-2的水平最低,检测值为12.64±7.36ug/l,IL-6的水平最高,检测值为5.24±2.86ng/l,与B组及C组相比较有统计学意义(P<0.01)；B组：肝：组织中IL-2和IL-6的水平介于A组及C组之间,检测值为15.45±6.10ug/l和3.05±2.76ng/l,与C组相比较无统计学意义(P>0.05);C组：肝组织IL-2的水平最高,检测值为16.14±7.48ug/l,IL-6的水平最低,检测值为3.88±0.84ng/l。4.HE染色结果：A组：HE染色可见肝小叶结构紊乱,肝素解离,肝细胞肿胀、变性,肝细胞间可见淋巴细胞没润,肝窦内明显充血。B组和C组：HE染色可见肝小叶结构清晰,肝细胞无肿胀及变性,未见淋巴细胞浸润,肝窦无充血。结论1.巨细胞病毒感染合并肝损伤可导致机体对乙肝疫苗免疫应答效果的降低；2.巨细胞病毒感染合并肝损伤导致外周血淋巴细胞亚群数量异常,引起免疫功能紊乱；3.先天性巨细胞病毒感染合并肝损伤引起IL-2水平降低,IL-6水平升高,影响机体对乙肝疫苗免疫应答效果。