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目的:研究血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme-2,ACE2)在大鼠肺微血管内皮细胞(rat pulmonary microvascular endothelial cell ,RPMVEC)上的表达,观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对RPMVEC的损伤作用及ACE2表达的影响。方法:采用RT-PCR、Western blot和免疫组化方法,检测体外培养的RPMVEC是否表达ACE2;引入内参半定量分析10μg/ml的LPS孵育RPMVEC后不同时相点ACE2表达的变化;用MTT比色法测定不同剂量LPS(0.1μg/ml-100μg/ml)作用后RPMVEC在540nm处的吸光度,以反映细胞存活率和代谢活性的变化。结果:1.体外成功分离培养出RPMVEC,并经形态学及FITC-BSI结合实验证实。2.RT-PCR法从细胞总RNA中扩增出ACE2的特异性条带,Western blot法在细胞蛋白提取液中检测出ACE2的蛋白印迹条带,免疫组化实验表明ACE2免疫组化反应产物主要位于RPMVEC的胞膜和胞浆。3.以10μg/ml的LPS处理RPMVEC后,用RT-PCR及Western blot法检测ACE2的变化,在3h、12h、24h时相点,ACE2 mRNA和蛋白的表达量均明显低于对照组。4.MTT比色实验表明,0.1μg/ml-100μg/ml浓度的LPS作用RPMVEC后,细胞存活率和代谢活性显著降低,并随着LPS浓度的增加而呈明显下降趋势。结论:1.成功进行了RPMVEC的体外培养,并鉴定为RPMVEC。2. RPMVEC可表达ACE2 mRNA和蛋白,其蛋白产物位于细胞的胞膜和胞浆。3.10μg/ml的LPS可下调RPMVEC中ACE2 mRNA和蛋白水平的表达。4. LPS可直接损伤RPMVEC,且LPS浓度与细胞损伤程度具有量效关系。