牛大力内生细菌的分离鉴定及其促生作用研究

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内生菌具有提高植物抗逆性、促进植物生长、修复生态环境和生物防治等多种作用。牛大力是我国传统中药材,目前研究多集中于化学成分、药理作用及栽培技术等方面,关于内生菌与其宿主之间相互作用的研究几乎空白。本研究以药用植物野生牛大力(Millettia speciosa Champ.)为实验材料,对其新鲜根茎中内生细菌进行分离鉴定,并初步探讨内生细菌的抑菌效果及其对宿主植物的促生作用。主要结果如下:(1)从牛大力块根和茎中共分离得到59株内生细菌,通过菌落形态特征、生理生化特性和16S rDNA基因测序方法将其鉴定分为4门6纲8目12科16属,并构建系统发育树,确定内生细菌分为20种,其中变形菌门细菌34株、厚壁菌门细菌16株、拟杆菌门细菌7株和放线菌门细菌2株,涉及到肠杆菌目,假单胞菌目、黄单胞菌目、芽孢杆菌目、黄杆菌目等,其中肠杆菌目的细菌种数最多,芽孢杆菌属细菌为优势菌群。(2)每种内生细菌选取一株代表菌株,对20种内生细菌进行促生潜力评估。结果表明,能够产IAA的有13株,占总数的65%,XDR1-2和NR5-3有较强合成IAA的能力,产IAA量分别为43.10 mg/L、35.48 mg/L;具有产铁载体能力的7株,其中6株菌分泌铁载体的活性均>50%,属于高螯合铁载体,以XDR1-2活性最高,达70.19%;具有溶磷性的有17株,占总数85%,TBR7、RH1-4等四个菌株的有效磷增量极显著增加,最高达17.44 mg/L;具有固氮能力内生细菌11株,占总数的55%。(3)不同菌液处理对种子萌发和幼苗根系生长均有不同程度的促进作用。18种菌液浸种提高了种子发芽率,与对照差值达0.88%~12.65%;TBR7、XDR3-4菌液对牛大力根鲜重促进作用效果较好,分别是对照组的3.94倍和3.08倍;这可能与内生细菌促进了植物体内SS酶活性、AGPase酶活性和SBE酶活性有关。(4)菌株活体抑菌试验表明,RH1-4、RH17-1和GR1-1等7株内生细菌对不同植物病原菌有较好的抑菌作用,其中RH17-1和RH1-4等对罗汉果斑枯病病原菌和苦玄参褐斑病病原菌抑菌作用显著。所筛选的抑菌菌株发酵液抗菌效果比菌株活体效果更好,其中RH17-1拮抗作用普遍较强,抗真菌谱较广。
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