论文部分内容阅读
本实验研究了L-茶氨酸对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的抑制作用,并探讨其作用机理。我们连续7天经食道给小鼠服用L-茶氨酸(50、100或200mg/kg),第7天,在给予L-茶氨酸2小时后,给小鼠腹腔注射CCl4(0.2%的橄榄油溶液)造成急性肝损伤。二十四小时后取血并处死小鼠取肝脏。用比色法分别检测血清ALT、AST活性和胆红素水平,用H&E染色法观察肝组织切片的病理学改变,以观察L-茶氨酸对急性肝损伤的抑制作用；免疫印迹法检测肝脏中CYP2E1的蛋白水平,以检测L-茶氨酸对CCl4激活的影响；用比色法检测肝脏MDA、GSH、 GSSG含量和GR、SOD、CAT三种抗氧化酶的活性,以检测L-茶氨酸对肝脏抗氧化能力的影响；ELISA法检测血清中TNF-α和IL-1β水平,免疫组化检测肝组织中COX-2和iNOS的表达水平,以观察L-茶氨酸对CCl4引起的肝脏炎症反应的影响；用免疫印迹法检测肝脏中active caspase-3和cleaved PARP蛋白水平,以观察L-茶氨酸对CCl4引起的肝细胞凋亡的信号通路激活的影响。实验结果表明：(1) L-茶氨酸能剂量依赖性地抑制CCl4诱导的血清中ALT、AST活性和胆红素水平的升高；(2)肝组织形态学观察结果表明L-茶氨酸能明显减轻CCl4诱导的肝组织病理学改变；(3) L-茶氨酸显著降低CCl4引起的脂质过氧化程度,抑制CCl4诱导的肝脏GSH含量和抗氧化酶活性的降低；(4) L-茶氨酸可以通过下调CYP2E1蛋白水平抑制CCl4的代谢激活；(5)L-茶氨酸能抑制氧化应激介导的炎症反应,显著降低血清中TNF-α和IL-1β含量的升高,抑制肝脏中COX-2与iNOS的表达；(6) L-茶氨酸能抑制CCl4诱导的肝脏caspase-3活化和PARP切割。结论：L-茶氨酸能通过抑制CCl4代谢激活与增强小鼠肝脏抗氧化能力来减弱炎症反应和肝细胞凋亡,从而抑制CCl4诱导的小鼠急性肝损伤。