【摘 要】
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研究目的真核细胞中一氧化氮(NO)作为第二信使和神经递质发挥着多种不同的功能,具有广泛的生物学效应和抗病毒作用,参与机体的多种生理及病理过程,其对疾病发生及发展的影响
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研究目的真核细胞中一氧化氮(NO)作为第二信使和神经递质发挥着多种不同的功能,具有广泛的生物学效应和抗病毒作用,参与机体的多种生理及病理过程,其对疾病发生及发展的影响是近年来研究的热点。诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)是产生一氧化氮的限速酶,广泛分布于机体内,一切影响iNOS活性的因素及影响iNOS基因转录、翻译的因素都会影响一氧化氮的生成,其中iNOS基因转录过程的调控是一氧化氮产量控制的主要因素。本研究首先运用噬菌体表面展示技术筛选出12种iNOS基因的调节蛋白,X-盒结合蛋白1(X-box binding protein1,XBP1)是其中一种iNOS基因的调节蛋白,他是CREB/ATF家族一个重要的转录因子,通过与真核基因启动子区域中顺式作用元件发生特异性相互作用、或者与其他相关蛋白质之间发生相互作用,激活或抑制转录,调节基因的表达,并通过整合这些不同的调节机制,激发无数基因的表达模式。为揭示真核细胞中iNOS基因的转录调控机制、反式作用因子XBP1对iNOS基因的调节作用,我们进一步针对筛选出的调节蛋白XBP1进行生物学功能的初步研究,对XBP1进行细胞内定位;筛选和构建XBP1与其他蛋白质间相互作用的连锁图,为阐明XBP1基因和iNOS基因的转录调节机制提供实验依据,为进一步揭示NO在肝细胞中的信号传递机制奠定理论基础。研究方法
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