【摘 要】
:
[背景]顺铂是一种十分有效的抗癌药物,它会产生活性氧物种(ROS),如超氧阴离子,可以耗尽耳蜗中的抗氧化保护分子。这些过程通过诱导凋亡导致耳蜗毛细胞死亡。氧化应激是一种病理状态,通过自由基作用的氧化应激直接或间接参与许多疾病的发病机制,包括内耳疾病。氧化损伤激活多种细胞内应激信号传导途径,包括丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族,肿瘤蛋白53,AKT/PKB途径,NF-κB,Janus激酶(JAK)
论文部分内容阅读
[背景]顺铂是一种十分有效的抗癌药物,它会产生活性氧物种(ROS),如超氧阴离子,可以耗尽耳蜗中的抗氧化保护分子。这些过程通过诱导凋亡导致耳蜗毛细胞死亡。氧化应激是一种病理状态,通过自由基作用的氧化应激直接或间接参与许多疾病的发病机制,包括内耳疾病。氧化损伤激活多种细胞内应激信号传导途径,包括丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族,肿瘤蛋白53,AKT/PKB途径,NF-κB,Janus激酶(JAK)和其他的成员。地塞米松作为一种临床常用药,对细胞内活性氧的产生具有预防作用。地塞米松作为临床常用药,可以抑制脂质过氧化反应,降低耳蜗组织MDA含量、增加超氧化物歧化酶(SOD)的活性,使内耳细胞更充分的清除氧自由基,降低顺铂所致的氧化应激状态,从而起到保护内耳的作用。前期课题组已证明在发育无明显异常的斑马鱼幼鱼侧线神经丘上存在着Shh基因和Gli1基因,表明Shh信号通路参加了斑马鱼幼鱼侧线神经丘的发育过程,且对其功能有维护作用。在顺铂损伤之后Shh信号通路在斑马鱼侧线毛细胞再生过程中重新被激活,在某种程度上抑制它的活性可以使侧线毛细胞再生减少,更加说明在顺铂损伤后Shh信号通路在斑马鱼侧线毛细胞再生过程中起到正向调控的作用。在这个基础上我们建立地塞米松-斑马鱼顺铂耳毒性模型,探讨地塞米松对顺铂致斑马鱼侧线神经丘毛细胞损伤的保护作用以及地塞米松对Shh信号通路的主要基因表达的影响。[目的]探讨地塞米松对顺铂致斑马鱼侧线神经丘毛细胞损伤的保护作用;探讨地塞米松对Shh信号通路的主要基因表达的影响。[方法](1)将受精后5天(5dpf)斑马鱼幼鱼分为对照组、顺铂组、顺铂+地塞米松组,分别给予不同的药物处理24h,撤药后用FM1-43FX观察不同时间段毛细胞数目。(2)利用顺铂、地塞米松建立斑马鱼氧化应激模型,在移除顺铂6h后利用DCFH-DA、DPPP荧光分子探针测定三组斑马鱼幼鱼体内的活性氧(ROS)、脂质过氧化产物(MDA)。(3)采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测三组抗氧化物酶基因sod1、cat1和gstr的表达水平。(4)采用斑马鱼整体原位杂交技术检测对照组、顺铂组、顺铂+地塞米松组斑马鱼侧线神经丘毛细胞Shh信号通路主要基因的表达。[结果](1)在移除顺铂后6h、12h、24h均观察到与对照组相比顺铂组、顺铂+地塞米松组侧线神经丘毛细胞数目明显降低。地塞米松预处理组与顺铂组相比可缓解毛细胞数目减少(P<0.05);而移除顺铂后48h,三组结果无明显统计学意义。(2)顺铂组斑马鱼体内ROS、MDA含量与对照组含量相比升高,差异均有统计学意义(P<0.05),同时顺铂+地塞米松组斑马鱼体内ROS含量显著低于顺铂组(P<0.05)。(3)顺铂组、顺铂+地塞米松组斑马鱼体内的cat1基因表达水平与对照组相应指标相比有显著性下降(P<0.05),而三组间sod1、gstr无明显统计学意义(P>0.05)。(4)在移除顺铂6h后,顺铂组斑马鱼侧线毛细胞与对照组相比Shh、Gli1基因的表达明显减少,而顺铂+地塞米松组与顺铂组相比其基因表达量相对增多。[结论](1)顺铂对斑马鱼侧线毛细胞具有损伤作用,而地塞米松预处理后,能改善顺铂导致的斑马鱼毛细胞损伤。(2)顺铂可致斑马鱼侧线毛细胞活性氧、MDA含量增加,而地塞米松有效的改善了顺铂导致的活性氧含量增加,进一步说明地塞米松降低斑马鱼幼鱼氧化应激水平。(3)顺铂使斑马鱼侧线毛细胞部分抗氧化物酶基因水平降低,地塞米松在顺铂诱导毛细胞损伤时上调部分抗氧化物酶基因活性,从而保护斑马鱼幼鱼毛细胞免受氧化应激的影响。(4)地塞米松对Shh信号通路起正向调控作用。
其他文献
研究背景性早熟(precocious puberty,PP)传统上定义为女孩在8岁之前、男孩在9岁之前出现第二性征。近三十多年来,世界各地关于青春期发育起始时间的横断面研究提示,女孩青春期发育的起始年龄有逐年下降的趋势。1999年劳森威尔金斯儿科内分泌学会建议提前性早熟界定年龄,在白人女孩及非洲裔女孩分别为7岁和6岁。但是这引起了广泛的争议,大多数儿科内分泌学家对此提出质疑。仅根据横断面流行病学调
目的:回顾性分析Wang手术治疗低龄漏斗胸的围术期相关指标,探讨Wang手术治疗低龄漏斗胸的疗效与技术特点,为低龄漏斗胸的手术治疗提供新方案、新思路。方法:收集2018年01月01日至2020年12月31日在广东省第二人民医院胸壁外科接受胸廓畸形矫治术治疗的漏斗胸病例,根据手术方式的不同,将患者分为Wang手术组与改良Nuss手术组。按照纳入与排除标准,Wang手术组共纳入患者125例,改良Nus
研究背景和目的:结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是最常见的癌症之一,在全球癌症中发病率和死亡率均居第三位。转移是结直肠癌患者死亡的主要原因,转移性结直肠癌患者5年生存率仅为12%-14%,因此研究结直肠癌转移的潜在机制至关重要。肿瘤微环境(Tumor Microenvironment,TME)即肿瘤生长的环境,免疫反应是其生物学特性之一。肿瘤在发展过程中受免疫应答机制的不断调
目的特发性肺纤维化(Idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一类与年龄相关的疾病,以进行性肺间质纤维化和肺容积缩小为特征,导致肺功能不全进而死亡,目前尚无有效的治疗手段。大量研究表明间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC)对IPF有着良好的治疗效果。本课题研究miR-199a-5p介导IPF患者来源MSCs(IPF-MSCs)衰老的机制,并
研究背景和研究目的慢性鼻窦炎伴鼻息肉(Chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP)是耳鼻喉科最常见的炎性疾病之一,首选保守治疗,对于已出现并发症,或鼻息肉较大影响呼吸的情况则需要手术,且该病反复发作亦是较棘手的临床挑战。既往研究提示,CRSwNP的发生发展机制尚未完全阐明,其病理表现主要为鼻黏膜上皮细胞增殖异常、排列紊乱,已知Yes相关蛋白(Ye
一、目的超声内镜(EUS)的应用日益增多,主要应用于胆胰疾病患者的诊断和治疗。经内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)是诊断和治疗胆胰疾病的重要手段,但其作为侵入性操作,存在一定创伤和风险。EUS安全性好,诊断胆胰疾病的准确性高,可减少部分诊断性ERCP的应用。ERCP术前EUS检查对即将进行的ERCP有何影响,目前研究尚无明确结论。本课题研究目的:探究ERCP术前进行EUS检查对胆胰疾病患者行ERCP
研究背景:慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)严重危害人类健康,中国肺健康研究中流行病学调查显示,中国总患病人数约9990万,已构成我国重大疾病负担。慢阻肺诊断和评估主要依赖于症状、肺功能检查,然而肺功能评估需要专业的仪器和严格的质控要求。肺音是由受过训练的专科医生应用听诊器进行肺部听诊(Auscultation)而获得,早期研究发现肺音减弱及喘鸣音的产生与气道阻塞相关。然而,慢阻肺诊断、治疗和预防全球
背景和目的帕金森病的认知功能障碍中,执行功能障碍通常可出现在帕金森病的早期,并对患者生活质量产生重要影响。近年来关于帕金森病患者认知功能相关的大脑的影像学研究结论尚不一致,PD患者执行功能及信息处理速度可能与背侧纹状体和额叶区域之间的多巴胺能神经递质环路相关,本研究旨在探索PD非痴呆患者的认知功能改变的特征,尤其是在执行功能和信息处理速度方面的变化,同时通过1H-MRS研究PD患者前额叶、前扣带回
目的:随着人口老龄化加剧,高血压、冠状动脉粥样硬化型心脏病、肥胖症等疾病的罹患率明显升高,致使心力衰竭的患病率也持续上升,预计至2030年,心力衰竭的患病率将增加至46%,并且心力衰竭将仍然是全世界主要的死亡原因。对于终末期心力衰竭患者,内科药物治疗与机械循环支持无法改善患者长期生存率,同时伴随心脏移植手术外科技术的改进与心脏保存方法、术后免疫治疗的不断进展,心脏移植仍然是终末期心力衰竭的最佳治疗
研究背景:间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)存在于多种组织中,具有自我更新能力,多向分化潜能和免疫调节功能。因此,MSCs是细胞治疗、组织工程研究中一种重要的种子细胞和基因治疗载体。近年来,人们尝试从各种组织中提取间充质干细胞,迄今为止,MSCs可以从多种组织中分离包括骨髓,牙齿,脂肪,外周血,皮肤,羊水,脐血和胎盘等组织提取。目前对人骨髓间充质干细胞的研究最为