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目的研究体外培养的兔晶状体上皮细胞(Lens epithelial cells, LECs)加入转化生长因子-β2(transforming growth factor,TGF-β2)及抗氧化剂谷胱甘肽(glutathione,GSH)、过氧化氢酶(catalase, CAT)后,晶状体上皮细胞的增殖、凋亡及平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA) mRNA的表达情况。探讨抗氧化剂影响TGF-β2诱导的晶状体上皮细胞凋亡及间质化的作用机制。材料与方法随机选取健康2～4周的家兔,雌雄及重量不限(郑州大学实验动物中心提供)。耳缘静脉空气栓塞处死,体外培养晶状体上皮细胞,观察细胞形态。细胞接近融合传代,取2、3代传代细胞进行实验,分别加入A: 75pg/mlTGF-β2; B: 75pg/mlTGF-β2+10mMGSH; C:75pg/mlTGF-β2+300U/mLCAT; D:10mMGSH; E: 300U/mLCAT;F：空白对照组。倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法检测12、24、48小时的细胞增殖抑制率,TUNEL法检测细胞凋亡,逆转录PCR(RT-PCR)法检测细胞α-SMA mRNA含量,各处理组间比较分析。结果1.倒置显微镜下观察,三天后原代细胞从囊膜边缘长出,细胞较透亮,形态呈多角形,伸出伪足胞浆较丰富。加入75pg/mlTGF-β2后,细胞间隙增加,呈现拉网状改变,细胞开始出现肿胀并随时间的推移细胞呈梭形改变,加入抗氧化剂后细胞改变减少。2.MTT法检测晶状体上皮细胞增殖抑制率：检测12、24、48h三个时间点,A组的细胞增殖抑制率分别为14.6±4.62%,28.8±3.83%,34.2±2.49%,B组细胞增殖抑制率分别为15.4±5.13%,28.6±3.78%,31.0±4.18%,C组细胞增殖抑制率分别为14.6±3.36%,27.2±3.96%,33.6±2.50%,A分别与B、C组比较P>0.05,差异无统计学意义。3. TUNEL法检测细胞凋亡：荧光显微镜下观察凋亡细胞呈绿色荧光。D、E、F组偶见呈绿色荧光的细胞,A组有较多绿色荧光细胞。B、C组绿色荧光的细胞数量明显减少。每个处理组随机选择三个视野,以凋亡细胞数量/视野细胞总数量来计算细胞凋亡率,F=142.873,P<0.05,各组之间细胞凋亡率不完全相同。A组细胞凋亡率为30.78±3.17%,分别与B、C组细胞凋亡率比较P<0.05,差异有统计学意义。4. RT-PCR检测晶状体上皮细胞中α-SMA蛋白mRNA表达：各实验组在516bp处出现特异性α-SMA条带。A组α-SMA mRNA灰度值为0.863±0.020,分别与B、C组α-SMA mRNA灰度值比较P<0.05,差异有统计学意义。结论1.TGF-β2可以抑制LECs增殖,并诱导细胞凋亡,促进上皮细胞间质化。2.加入抗氧化剂GSH、CAT后可以降低LECs凋亡及间质化,但对细胞增殖影响不大。活性氧可能作为一种细胞信号传导分子参与了TGF-β2引起的细胞凋亡、间质化过程。