【摘 要】
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目的 利用免疫亲和层析技术用自行制备的抗人肺癌单克隆抗体mAbN-35纯化其相应的肺癌相关抗原N35蛋白。 方法 培养P35杂交瘤细胞，收集培养上清，利用Protein A-Sepharose CL-
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目的 利用免疫亲和层析技术用自行制备的抗人肺癌单克隆抗体mAbN-35纯化其相应的肺癌相关抗原N35蛋白。 方法 培养P35杂交瘤细胞，收集培养上清，利用Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析法纯化单抗N-35；用纯化得到的单抗与溴化氰活化的Protein A-Sepharose CL-4B制备免疫亲和柱；再将肺腺癌GLC-82细胞的裂解液通过此免疫亲和柱，纯化肺癌相关抗原N35。 结果 从肺腺癌GLC-82细胞的裂解液中纯化得到分子量为80KDa的N35蛋白，经SDS-PAGE分析达到了电泳纯。 结论 应用Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析法纯化单克隆抗体的效率高、纯度好；应用溴化氰活化的Protein A-Sepharose CL-4B免疫亲和层析法纯化肺癌相关抗原N35也有较高的效率和纯度；纯化得到的肺癌相关抗原N35分子量为80KDa，是一种新的肿瘤相关抗原。
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