目的:探讨真核翻译起始转录因子3a(Eukaryotic translation initiation factor 3a,eIF3a)在心肌致密化发生过程中的作用,初步阐述突变基因eIF3a在心肌致密化不全的遗传学发生机制。方法:对临床发现的散发小家系进行外周血全外显子测序得到突变基因eIF3a(c.1145A->G),在H9C2细胞系水平构建过表达腺病毒突变组Ad-M-eIF3a、野生组Ad-W-eIF3a、空载组Vector和空白组Blank,采用RT-PCR技术检测各组细胞转染后eIF3a的mRNA表达水平,CCK8技术明确各组细胞转染后增殖速度。采用流式细胞技术对细胞周期、细胞凋亡情况进行检测;对各组细胞进行伤痕愈合实验以测定细胞迁移速度,利用细胞免疫荧光技术、Western blot明确黏着斑蛋白的表达;对正常人来源的诱导多潜能干细胞进一步诱导分化为心肌细胞,并对其进行过表达突变组Ad-M-eIF3a、野生组Ad-W-eIF3a及空载组Vector腺病毒转染,在心肌分化过程中采用RT-PCR技术检测干细胞表面标记、心肌特异性标志物表达的变化情况;Western blot技术检测转染后H9C2细胞各组ERK1/2蛋白磷酸化表达水平。结果:在H9C2细胞模型中,突变组Ad-M-eIF3a较野生组相比细胞增殖能力明显下降(P<0.05),而流式细胞结果提示各组细胞周期无明显差异,突变组细胞凋亡明显增加(P<0.001);划痕实验结果显示,与野生组相比,突变组细胞迁移能力增强(P<0.05);共聚焦、Western blot提示黏着斑蛋白表达增强(P<0.05);同时在人源性iPSC向心肌细胞诱导分化过程中,突变组Ad-M-eIF3a较正常组相比心肌分化干细胞表面标志表达下降,而心肌特异性转录因子NKx2.5(早期)高表达(P<0.01)、cTnT(晚期)低表达(P<0.01),两组呈相反趋势;突变组与野生组相比,磷酸化ERK1/2蛋白表达下降(P<0.01)。结论:在H9C2细胞模型中,新发突变eIF3a能够通过促进细胞凋亡,从而降低细胞增殖能力,并通过提高黏着斑蛋白的蛋白表达水平和改善其胞内分布,进而影响细胞迁移能力;在iPSC-CMs细胞模型中,突变基因eIF3a使得心肌转录因子NKx2.5(早期)高表达、cTnT(晚期)低表达,两组呈相反趋势,提示突变基因可能使得诱导心肌出现分化延迟现象;以上改变其可能的作用机制是突变基因eIF3a降低ERK1/2磷酸化蛋白水平,从而使得心肌细胞致密化过程中细胞增殖抑制、迁移增加,心肌分化延迟,最终导致心肌致密化不全。