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目的：E-钙粘蛋白(E-cadherin, E-cad)质粒(pIRES2-EGFP-ECAD)转染人腹膜间皮细胞永生化细胞株(HMrSV5),观察E-cad的过表达对腹膜间皮细胞上皮细胞-间充质转分化(Epithelial-Mesenchymal Transition, EMT)的影响。方法：(1)采用大肠杆菌DH5α进行pIRES2-EGFP-ECAD质粒及空白质粒(Vector)扩增,酶切鉴定,RT-PCR验证。(2)体外培养HMrSV5,将HMrSV5分为正常对照组、E-cad转染组、空质粒转染组,通过脂质体转染法(lip LTX)转染pIRES2-EGFP-ECAD质粒及空质粒,倒置显微镜下观察细胞形态学的变化；流式细胞术评估转染效率,采用RT-PCR、Western Blot分别观察转染后12h、24h、36h、48h、72h E-cad的mRNA及蛋白表达。(3)将HMrSV5分为正常对照组、TGF-β刺激组,采用Western Blot.细胞免疫荧光观察TGF-p刺激后12h、24h、36h、48h E-cad、 α-SMA的蛋白表达；验证iur-β刺激对HMrSV5EMI的影响。(4)将HMrSV5分为正常对照组、TGF-β刺激组、pIRES2-EGFP-ECAD质粒转染+TGF-p刺激组,通过脂质体转染法(lip LTX:转染pIRES2-EGFP-ECAD质粒,并分别给予TGF-β刺激,采用RT-PCR检测转染+刺激(或单纯刺激)后12h、24h、36h、48h E-cad mRNA的表达,采用Western Blot方法检测转染+刺激及单纯刺激后12h、24h、36h、48h α-SMA、Vimentin的蛋白表达；采用细胞免疫荧光方法检测转染+刺激(或单纯刺激)后12h、24h、36h、48h E-cad、 α-SMA的蛋白表达,观察E-cad的过表达对TGF-β诱导的HMrSV5EMT的影响。结果：(1)扩增质粒经限制性内切酶酶切电泳鉴定,]RT-PCR证实,扩增质粒序列无突变。(2) pIRES2-EGFP-ECAD质粒转染HMrSV512h细胞内E-cad mRNA表达量最高,随后逐步下降,与正常对照组比较有差异(p<0.05),转染后12h细胞内E-cad表达开始上调,36小时达到峰值,随后逐渐下降,与正常对照组及空质粒转染组比较均有显著差异(p<0.01)。(3) TGF-β刺激HMrSV5后,细胞内α-SMA表达逐步上调,呈时间依赖性趋势,与正常对照组相比有显著差异(p<0.01)。(4)转染后+刺激组与单纯刺激组比较,细胞内α-SMA、Vimentin表达减弱,E-cad表达增强,差别均具有显著统计学意义(p<0.01)。结论：(1) pIRES2-EGFP-ECAD质粒转染后HMrSV5细胞E-钙粘蛋白表达上调。(2)过表达E-cad可以抑制TGF-β刺激诱导的HMrSV5表型转分化。