禾谷镰孢菌中DNA双链断裂修复元件FgRad50的基本生物学功能研究

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:archer_zhang
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在线性基因组的进化过程中,保护自然染色体末端以防止DNA损伤修复机制的触发和酶的攻击变得至关重要。端粒由重复的G-richDNA和特殊蛋白质组成的紧密调控的复合物。MRN复合物是修复机制中的一个主要成员,由Mre11,RAD50和NBS1蛋白组成。Rad50基因编码的蛋白调节MRN复合物的活性。目前Rad50在小麦赤霉病病原菌(Fusarium graminearum)中的功能尚不清楚。通过double-joint PCR方法获得缺失突变体,ΔFgRad50在PDA培养基上与野生型对比生长速率降低了约30%,回补体恢复到野生型水平;缺失突变体AFgRad50在CMC中产孢量相较于野生型降低了约40%,回补体恢复到野生型水平;AFgRad50的有性生殖受到了影响,在黑光灯诱导后AFgRad50产生的子囊壳相对于野生型降低了一半,回补体恢复到野生型水平。ΔFgRad50对多菌灵,H202,咖啡因以及Mg2+的敏感性增加,对戊唑醇,SDS的敏感性降低。通过将PH-1和ΔFgRad50接到田间麦穗测定致病力,结果表明突变体的侵染力在开花的小麦穗部上仅仅只在接种点处侵染,致病力明显降低,而且ΔFgRad50的脱氧雪腐镰刀菌烯醇产量降低了约6倍,应证这一结果。qRT-PCR检测诱导产毒过程中Tri基因的转录水平,发现在ΔFgRad50中,Tri基因系列的表达量对比野生型PH-1都有很大程度的降低。总之,这项研究的结果表明,FgRad50不仅在真菌发育、次级代谢和毒力的调节中发挥关键作用,而且在禾谷镰刀菌也在多重应激反应中也起关键作用。
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