苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis简称Bt)是一种昆虫病原细菌,因其产生的毒素对多种害虫有特异的毒杀作用而发展成为一种成功的微生物杀虫剂,广泛用于农林及卫生害虫的生物防治。Bt商业化应用已有60多年的历史,多年以来,Bt制剂一直被认为是安全的生物杀虫剂,因为最初认为它仅对鳞翅目昆虫有毒性,而对哺乳动物和非靶标生物无毒。但是,随着对Bt研究的深入,每年都有新的菌株和毒素被鉴定出来,其杀虫谱也越来越宽广。现在认为,Bt含有的多种毒素不仅对无脊椎动物节肢动物门的鳞翅目、双翅目、鞘翅目、直翅目、膜翅目、半翅目、等翅目等16个目有毒性,还对线性动物门、原生动物门、扁形动物门中的有些种类有杀虫活性,其中也有一些对人及哺乳动物有害。这对“Bt仅对鳞翅目昆虫有毒性”的安全性基础产生了很大冲击。另外,Bt与作为病原菌的蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus简称Bc)在形态、生理及基因组等很多方面具有高度的相似性。近年发现Bt含有与蜡状芽孢杆菌具有很高的同源性的可能对人和动物有害的溶血素及肠毒素等,这对Bt的安全性提出了新挑战。 采用已发表的蜡状芽孢杆菌肠毒素基因的序列设计三对特异引物Hb11/Hb12、BceT1/BceT2和Ent1/Ent2,对16株本室保存及45株引自美国芽孢杆菌遗传保藏中心(BGSC)苏云金芽孢杆菌进行了溶血素BL、肠毒素T和ent基因三种肠毒素基因的PCR检测。结果表明,含有hb1A基因、ent基因及bceT基因的BGSC菌株分别占60%、44.4%及66.7%,本室保存菌株含有hb1A基因、ent基因及bceT基因的比例分别为:100%、93.8%及68.8%。将Bt 8010 hb1A基因、ent基因及bceT基因的PCR产物回收纯化后测序,经NCBI网站在线的BLAST软件进行同源性分析,结果如下,hb1A基因片段与已