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大豆中蛋白质含量高达40%,氨基酸组成比较合理。大豆蛋白的研究与利用已引起人们广泛的关注。大豆多肽是大豆蛋白经酶解后产生的分子量较小的化合物,在营养价值与生理功能上都优于大豆蛋白。为此,本文较系统地研究了大豆多肽制各的条件以及大豆多肽的理化性质与生物活性。结果如下: 1.大豆多肽的制备、性质与分级 在大豆分离蛋白酶水解过程中,采用磷酸缓冲液来维持体系的pH值。以水解物对羟基自由基的清除率及大豆蛋白的水解度为指标,得出木瓜蛋白酶的适宜酶解条件为:pH=8.3,t=4h,[E]/[S](W/W)=4%,[S](W/V)=5%,T=70℃;中性蛋白酶ASI.398适宜的酶解条件为:pH=6.4,t=4h,[E]/[S](W/W)=2%,[S](W/V)=6%,T=40℃。试验证明,在此酶解条件下得到的大豆多肽经过超滤,分子量低于10000Dal,并具有较强的抗氧化作用。 RP-HPLC分析表明,大豆多肽的氨基酸组成与大豆蛋白基本相同,且在整个pH范围内均有良好的溶解性及低粘度。采用Sephadex G-25对大豆多肽进行了初步分级,得到了3个级分。 2.大豆多肽的生物活性研究 研究了大豆多肽抗油脂氧化、抑制脂肪氧合酶及清除自由基的作用,以及对小鼠肝组织匀浆、肝线粒体和红细胞丙二醛(MDA)含量的影响,结果显示:在60℃时,大豆多肽对猪油与豆油的自动氧化均有一定的抑制作用:对脂肪氧合酶的抑制作用显著:对Fenton体系产生的羟基自由基具有明显的清除作用,其IC50值为6.220mg/ml。在浓度(1mg/ml—50mg/ml)范围内,随大豆多肽浓度的增加,清除率增加迅速,最大清除率为85.4%。且试验证明大豆多肽不具有助氧化作用。 大豆多肽对小鼠肝组织匀浆在温浴过程中自发产生的丙二醛有一定的抑制作用,对Fe2+或H2O2:诱发MDA的生成具有显著的抑制作用;大豆多肽能极显著地降低小鼠肝线粒体和红细胞中的脂质过氧化产物MDA的含量。 华中农业大学2001届硕士学位论文 大豆多肤在200、400、800mg/kg.d剂量能显著增加小鼠免疫器官胸腺和脾脏的重量,增重量分别为23.1%、43.5%、51.4%和25.1%、31.5%、32.2%,显著增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,并呈剂量效应关系。 大豆多肤在剂量200、400、800m创kg.d时能显著提高小鼠肌糖原和肝糖原的含量,并呈良好的量效关系。 此外,还研究了大豆多肤对小鼠脂肪代谢的影响。结果表明200、400、800m叭g.d剂量的大豆多肤能显著降低小鼠腹部皮下脂肪的含量,减少量分别为17.9%、22.9%、31.9%。