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泌乳母猪为乳汁的合成与分泌进行大量的代谢,后者需要大量的氧分子,易产生大量氧自由基和部分脂质过氧化物。超营养剂量硒可提高牛和羊产奶量和乳成分,但超营养剂量硒在母猪上未见报道。本文以围产期母猪和猪乳腺上皮细胞为研究对象,采用体内外试验相结合的方法,开展关于饲粮超营养剂量硒对夏季母猪泌乳性能的影响及其机理研究。主要研究内容及结果如下:第一部分:风机-水帘降温和饲粮超营养剂量硒对夏季母猪泌乳性能及乳成分的影响。试验采用2×2因子设计,因子1为分娩舍环境（传统舍vs.风机-水帘舍）,因子2为围产期饲粮中硒水平（0.3 vs.1.2 mg/kg Se,酵母硒）。选取40头“长×大”经产母猪,按胎次、体况及历史繁殖成绩均衡分配的原则分为4组,每组10个重复,每个重复1头母猪。饲养试验从母猪妊娠第85天开始至21天断奶结束。结果表明:（1）繁殖性能:试验处理对母猪总产仔数、死胎、木乃伊、活仔数、初生窝重、初生个体重、产程、分娩间隔、胎盘重、胎盘/仔猪重和胎盘效率无显著影响（P＞0.10）。（2）泌乳性能:试验处理对母猪初乳产量和泌乳期背膘厚无显著影响（P＞0.10）。相比传统分娩舍,风机-水帘分娩舍母猪泌乳第2、3周和第1～3周ADFI升高（P＜0.05）,其哺乳仔猪第1周ADG升高（P＜0.05）,第14天仔猪窝重和平均个体重有升高的趋势（P＜0.10）。相比对照饲粮组,超营养剂量硒组仔猪断奶前成活率有升高的趋势（P＜0.10）。分娩舍环境×饲粮硒交互作用对母猪泌乳性能无显著影响（P＞0.10）。（3）乳成分:相比传统分娩舍,风机-水帘分娩舍母猪第14天常乳中乳蛋白、乳糖、非脂固形物和灰分含量升高（P＜0.05）。相比对照饲粮组,饲粮超营养剂量硒提高母猪初乳中乳蛋白（P＜0.05）、乳糖（P＜0.05）、非脂固形物（P＜0.05）和灰分含量（P＜0.10）,同时提高第7天和14天常乳中脂肪含量（P＜0.05）。（4）免疫球蛋白:分娩舍环境和分娩舍环境×饲粮硒交互作用对母猪血浆、乳汁及哺乳仔猪血浆中免疫球蛋白浓度无显著影响（P＞0.10）。相比对照饲粮组,饲粮超营养剂量硒提高母猪泌乳第21天血浆Ig A（P＜0.05）、Ig G（P＜0.10）和Ig M浓度（P＜0.10）,初乳Ig A（P＜0.10）和Ig M浓度（P＜0.05）,第21天常乳IgA（P＜0.05）、IgG（P＜0.10）和IgM浓度（P＜0.10）,且提高1日龄哺乳仔猪血浆Ig A（P＜0.05）、Ig G（P＜0.10）和Ig M浓度（P＜0.10）及21日龄哺乳仔猪血浆Ig A（P＜0.05）和Ig G浓度（P＜0.05）。由此可见,风机-水帘降温通过提高母猪泌乳期采食量,改善母猪乳成分和泌乳性能;而饲粮超营养剂量硒通过改善母猪乳成分和母仔猪间免疫球蛋白的传递,提高哺乳仔猪断奶前成活率。第二部分:风机-水帘降温和饲粮超营养剂量硒对夏季母猪及其后代哺乳仔猪抗氧化状态的影响。试验采用2×2因子设计,具体试验设计同第一部分。采集母猪分娩当天和泌乳第21天血浆、初乳和第21天常乳、后代1日龄和21日龄哺乳仔猪血浆,测定其中硒含量和抗氧化指标。结果表明:（1）分娩舍环境和环境×饲粮硒交互作用对母猪血浆、初乳和常乳及后代哺乳仔猪血浆中硒含量无显著影响（P＞0.05）。与对照饲粮组相比,超营养剂量硒组母猪分娩当天和泌乳第21天血浆、初乳和第21天常乳、后代1日龄和21日龄哺乳仔猪血浆硒含量均显著升高（P＜0.05）。（2）分娩舍环境×饲粮硒的交互作用对母猪血浆、乳汁和后代哺乳仔猪血浆抗氧化状态无显著影响（P＞0.05）。（3）与传统分娩舍相比,风机-水帘分娩舍母猪分娩当天血浆GSH-Px活力（P＜0.10）和GSH含量升高（P＜0.10）,21天常乳GSH含量升高（P＜0.10）,后代哺乳仔猪1日龄血浆GSH-Px活力（P＜0.05）和GSH含量升高（P＜0.10）,21日龄仔猪血浆T-AOC（P＜0.10）、SOD活性（P＜0.05）和GSH含量升高（P＜0.10）,而MDA含量降低（P＜0.05）。（3）与对照组饲粮相比,超营养剂量硒组母猪分娩当天和泌乳第21天血浆GSH-Px活力均升高,MDA含量均降低（P＜0.05）,初乳MDA含量降低（P＜0.05）,第21天常乳T-AOC升高（P＜0.10）,MDA含量降低（P＜0.10）,后代1日龄哺乳仔猪血浆GSH-Px活力升高（P＜0.10）,MDA含量降低（P＜0.10）,21日龄仔猪血浆GSH-Px活力升高（P＜0.10）,MDA含量降低（P＜0.05）。由此可见,风机-水帘降温对母猪、乳汁和仔猪硒营养状态并无影响,但提高母猪、乳汁和仔猪的抗氧化状态,母猪饲粮中添加超营养剂量硒促进母猪-乳汁-仔猪的硒和抗氧化状态的母源传递。第三部分:母猪饲粮超营养剂量硒对后代断奶仔猪肠道抗氧化状态及肠道功能的影响试验采用单因子试验设计,为第一部分中传统妊娠舍和传统分娩舍饲养的两组（0.3和1.2 mg/kg硒组）。断奶后第3天,每组选取6窝仔猪,每窝选1头仔猪,每组6头仔猪（公母各半）,采血后,屠宰仔猪采集十二指肠、空肠和回肠组织样品。结果表明:（1）母猪饲粮超营养剂量硒提高后代断奶仔猪血浆硒含量（P＜0.05）和小肠相对重（P＜0.10）。（2）母猪饲粮超营养剂量硒提高后代断奶仔猪十二指肠SOD活性（P＜0.10）,十二指肠、空肠和回肠T-AOC和GSH-Px活性（P＜0.05）,降低仔猪十二指肠、空肠和回肠MDA含量（P＜0.05）。（3）母猪饲粮超营养剂量硒上调后代断奶仔猪十二指肠、空肠和回肠SEPHS2、SEPP1、GPX1和TXNRD1相对m RNA表达量（P＜0.05）。（4）母猪饲粮超营养剂量硒下调后代断奶仔猪十二指肠TNF-α（P＜0.05）、IL-6（P＜0.05）、IFN-γ（P＜0.10）、空肠TNF-α（P＜0.10）、IL-6（P＜0.05）、IFN-γ（P＜0.10）和回肠TNF-α相对m RNA表达量（P＜0.05）,上调空肠TGF-β1和IL-10相对m RNA表达量（P＜0.05）。（5）母猪饲粮超营养剂量硒上调后代断奶仔猪十二指肠ZO-1、空肠Occludin、Claudin和ZO-1相对m RNA表达量（P＜0.05）。（6）母猪饲粮超营养剂量硒提高后代断奶仔猪十二指肠（P＜0.05）、回肠（P＜0.05）和空肠SEPHS2相对蛋白表达量（P=0.117）、十二指肠、空肠和回肠SEPP1相对蛋白表达量（P＜0.05）,十二指肠和空肠GPX1相对蛋白表达量（P＜0.05）和十二指肠TXNRD1相对蛋白表达量（P＜0.05）。由此可见,母猪饲粮中添加超营养剂量硒改善后代断奶仔猪血浆硒营养状态、肠道抗氧化状态、硒蛋白表达、炎症因子和屏障功能。第四部分:硒代蛋氨酸对母猪乳腺上皮细胞硒蛋白合成及抗氧化功能的影响。以母猪乳腺上皮细胞（PMEC）为体外模型,分别添加0、0.5、1.0、2.0和4.0μM Se-Met处理细胞24、48和72 h,检测细胞活力。再用0、0.5、1.0、2.0和4.0μM Se-Met处理细胞48 h,采用荧光定量PCR检测细胞硒蛋白转录组的表达,Western blot检测SEPHS2、SEPP1、GPX1和TXNRD1蛋白表达,及试剂盒检测细胞GPX和TRX活性。结果表明:（1）Se-Met处理PMEC 24、48和72 h,细胞活力均先升高后降低,当Se-Met处理细胞24 h时,0.5、1.0和2.0μM Se-Met组细胞活力均显著高于对照组（P＜0.05）;当Se-Met处理细胞48 h时,0.5和1.0μM Se-Met组细胞活力均显著高于对照组（P＜0.05）;当Se-Met处理细胞72 h时,各处理组与对照组之间细胞活力均无显著差异（P＜0.05）,但0.5μM Se-Met组比4.0μM Se-Met组细胞活力显著提高（P＜0.05）。（2）随Se-Met浓度的升高,细胞GPX4、TXNRD2、SELX、SELM和SELV相对m RNA表达量无变化,TXNRD3、SEPN1和SELO相对m RNA表达量先降低后升高,17种硒蛋白相对m RNA表达量先升高后降低,在0.5μM时表达量最高,包括SEPHS2、SEPP1、GPX1、GPX2、GPX3、GPX6、TXNRD1、SELK、SEPW1、DIO1、DIO2、DIO3、SEP15、SELS、SELH、SELI和SELT。（3）随Se-Met浓度的升高,细胞SEPHS2、SEPP1、GPX1和TXNRD1相对蛋白表达量均先升高后降低,在0.5μM时表达量最高。（4）随Se-Met浓度的升高,母猪乳腺上皮细胞GPX和TRX活力先升高后降低,在0.5μM时活力达到最大值。由此可见,0.5μM Se-Met通过提高PMEC硒蛋白的生物合成和抗氧化功能,促进PMEC细胞增殖。综上所述,体内试验揭示饲粮超营养剂量硒（1.2 mg/kg）通过改善母猪乳成分和母仔猪间免疫球蛋白的传递,提高哺乳仔猪断奶前成活率。同时促进母猪-乳汁-仔猪的硒和抗氧化状态的母源传递。改善后代断奶仔猪血浆硒营养状态、肠道抗氧化状态、硒蛋白表达、炎症因子和屏障功能。体外试验揭示,Se-Met（0.5μM）通过提高PMEC硒蛋白的生物合成和抗氧化功能,促进PMEC细胞增殖。