【摘 要】
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豆科葛属藤本植物葛（Pueraria lobata）是国家卫生健康委公布的药食同源植物,既有很好的营养价值,又有很强的保健功效,含黄酮类、香豆素类等营养成分,具有很大的开发价值。鲜食正在成为葛根利用的发展方向,但其繁殖方式与后期的早衰成为葛根产业化的限制因素。本研究以鲜食葛茎尖、茎段和叶片为材料,通过外植体消毒、愈伤组织诱导、出芽诱导、不定芽增殖、不定芽伸长、生根培养,初步建立鲜食葛离体繁殖体系。
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豆科葛属藤本植物葛（Pueraria lobata）是国家卫生健康委公布的药食同源植物,既有很好的营养价值,又有很强的保健功效,含黄酮类、香豆素类等营养成分,具有很大的开发价值。鲜食正在成为葛根利用的发展方向,但其繁殖方式与后期的早衰成为葛根产业化的限制因素。本研究以鲜食葛茎尖、茎段和叶片为材料,通过外植体消毒、愈伤组织诱导、出芽诱导、不定芽增殖、不定芽伸长、生根培养,初步建立鲜食葛离体繁殖体系。通过探讨鲜食葛生长后期在不同追肥量下光合色素含量、抗性相关物质含量、抗氧化酶活性、代谢酶活性、营养物质、大量元素含量等生理变化及其对产量的影响,以期为鲜食葛后期生长的追肥提供理论参考与技术支撑。主要结果如下:1.建立了鲜食葛离体繁殖体系,生根率与成苗率高,移栽到大田后,初步观测生长良好。以本试验的鲜食葛为材料,其茎尖最佳消毒方案为2.2%次氯酸钠处理3min,消毒效果为91.11%;叶片最佳消毒方案为10%过氧化氢处理3min,消毒效果为95.56%;茎段最佳消毒方案为30%过氧化氢处理6min,消毒效果为70.36%。茎尖最佳取材时间为7月,叶片为5月,茎段为5月,三种外植体在9月取材的消毒效果均较差。茎尖愈伤组织诱导最佳组合为MS+2,4-D（2mg/L）,诱导率100%。叶片愈伤组织诱导最佳组合为MS+2,4-D（0.10～2.00mg/L）+6-BA（0.10～0.20mg/L）,诱导率100%且愈伤量多。茎尖出芽诱导最佳组合为MS+NAA（0.001、0.005mg/L）+6-BA（0.500mg/L）,诱导率为66.67%。不定芽增殖最佳组合为MS+NAA（0.001mg/L）+6-BA（0.080mg/L）+蔗糖（1%）,繁殖系数为5.55。不定芽伸长最佳组合为MS+6-BA（0.100mg/L）+IBA（0.100mg/L）+NAA（0.007mg/L）,有效繁殖系数为1.28。生根最佳组合为1/2MS+IBA（0.15mg/L）,生根率为94.44%,成苗率为94.44%。2.后期大田追施适宜浓度的磷酸二氢钾可减缓鲜食葛植株衰老进程,提高抗性,改善生理和营养指标,显著增加葛根产量。（1）动态研究表明,在本试验条件下,葛根生长后期大田追施磷酸二氢钾可减缓鲜食葛叶片中叶绿素含量的降低速度,防止植株早衰,有利于同化物向地下部运输。（2）大田追施磷酸二氢钾能增强鲜食葛的抗逆性,但对鲜食葛中抗性相关物质有不同的影响。其中较高浓度的磷酸二氢钾有利于块根中可溶性糖含量的积累;块根中脯氨酸含量随时间呈下降趋势,大田追施磷酸二氢钾1.5kg/667m~2后,在短期内能增加块根中脯氨酸含量,但在一段时间后追肥的处理反而会降低块根中脯氨酸的含量;磷酸二氢钾对块根中的可溶性蛋白和丙二醛含量没有显著影响。大田追施磷酸二氢钾降低了叶片中可溶性糖含量的积累;叶片中脯氨酸含量随时间呈上升趋势,磷酸二氢钾在短期内降低了叶片中脯氨酸含量的积累,但一段时间后则有利于叶片中脯氨酸含量的增加,1.0～2.0kg/667m~2效果较好;大田追施磷酸二氢钾对叶片中的可溶性蛋白含量没有显著影响;其中施用较高浓度的磷酸二氢钾（2.0kg/667m~2）促使叶片中丙二醛含量的增加。（3）大田追施磷酸二氢钾能提高块根中超氧化物歧化酶活性,对谷胱甘肽过氧化物酶活性没有显著影响,低浓度的磷酸二氢钾（0.5kg/667m~2）可提高块根中的过氧化物酶活性。较低浓度的磷酸二氢钾（0.5kg/667m~2）可提高块根中的硝酸还原酶活性;磷酸二氢钾可提高块根中苯丙氨酸解氨酶活性,但降低了淀粉酶活性。（4）大田追施磷酸二氢钾对块根中各营养物质有不同的影响。其中较高浓度的磷酸二氢钾能加快块根中淀粉和总糖的积累,追肥2.0kg/667m~2效果较好;少量磷酸二氢钾（0.5kg/667m~2）在短期内促进了块根中蔗糖含量的积累,但在一段时间后则降低了蔗糖含量的积累;磷酸二氢钾1.5kg/667m~2促进了块根中总氨基酸含量的积累;磷酸二氢钾降低了块根中类黄酮的含量。（5）大田追施磷酸二氢钾对大量元素有不同的影响。较高浓度的磷酸二氢钾（1.5～2.0kg/667m~2）在短期内能提高块根中的磷含量,但一段时间后便回落;大田追施磷酸二氢钾对叶片中的磷含量在短期内没有显著影响,在后期才表现出促进磷含量的积累的现象;大田追施磷酸二氢钾对块根中钾含量的增加没有显著影响;可减缓叶片中钾含量的降低速度;对块根和叶片中的氮含量没有显著影响。综合分析,大田追施适当浓度的磷酸二氢钾显著提高了鲜食葛产量,改善品质。其中施用1.0kg/667m~2产量最高;1.5kg/667m~2对鲜食葛块根主要营养成分含量及产量的形成综合效果最优。
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