吡啶高效降解菌的筛选及降解特性研究

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农药、焦化和医药等废水中一般含有较高浓度的吡啶。吡啶是一种含氮杂环化合物。因其致畸、致癌、致突变的特性被列为优先污染物,备受环境研究者的关注。近年来,利用微生物特别是筛选和培养高效降解菌去除废水中的吡啶成为了研究热点。本论文针对高盐环境下废水中吡啶的降解开展了研究工作。从农药厂生物处理池的活性污泥中经过驯化和筛选分离出耐高浓度吡啶的多株高效降解菌,选择其中降解效果较好的菌株,探讨了不同温度、p H、吡啶浓度及高盐分等环境因素对两株菌降解废水中吡啶的效果的影响,借助UV、GC-MS、LC/MS等分析手段初步解析了两株菌降解吡啶的途径。通过研究得到以下主要结论:(1)从湖南省某农药厂废水生物处理池的活性污泥中成功驯化并筛选分离出了6株可以耐受高浓度吡啶高效降解菌,其中3株具有较好的吡啶降解性能,分别命名为PDX01、PDX02、PDX03。经16S r DNA菌种鉴定,PDX01、PDX02为红球菌属,PDX03为博德特氏菌属。其中PDX03是具有降解高浓度吡啶能力的一株新菌。(2)PDX02和PDX03对环境温度、p H和吡啶浓度的耐受性均很好,但两者的耐受范围稍有不同。当初始吡啶浓度为1000mg/L时,PDX02和PDX03在20℃-40℃的温度范围内分别可在64h和96h内将吡啶完全降解。p H为5-10时,PDX02可在48h内将吡啶完全降解;p H为6-9时,PDX03可在88h内将吡啶完全降解。吡啶浓度为2000mg/L时,PDX02和PDX03在88h的降解率分别为100%和73%。(3)PDX02和PDX03可以处理含高浓度氯化钠、硝酸钠和硫酸钠等盐的吡啶废水。在吡啶浓度为1000mg/L的条件下,氯化钠浓度在50g/L以内时,两株菌都可以在56h内将吡啶完全降解。硝酸钠浓度为60g/L以内时,PDX02和PDX03分别可在48h和72h内将吡啶完全降解。硫酸钠浓度为50g/L以内时,PDX02可在56h内将吡啶完全降解;而PDX03完全降解吡啶的时间随着硫酸钠浓度的升高而缩短,硫酸钠浓度为50g/L时比5g/L时缩短16h。(4)通过抑制动力学方程(Haldane、Yano、Webb和Aiba方程)和非抑制动力学方程(Monod方程)拟合吡啶对PDX02和PDX03生长的影响,发现吡啶对两株菌的生长影响动力学符合抑制动力学方程;随着吡啶浓度从500mg/L升高至-2000mg/L,PDX02的比生长速率一直下降,而PDX03的比生长速率表现出则先增大后变小的趋势。(5)通过UV、GC-MS、LC-MS等手段检测吡啶降解过程的中间产物,以及测定吡啶降解过程中细菌中特征酶的活性,初步确定PDX02降解吡啶是通过直接开环的方式,而菌PDX03降解吡啶的可能路径主要有吡啶的羟基化、羧基化和羰基化三个途径。
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