【摘 要】
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液氮超低温保存是目前植物种质资源长期保存的理想方法。本文总结了近十年来超低温保存植物材料所取得的主要成果。本文以绿色巴夫藻(Pavlova viridis)和球等鞭金藻(Isochrys
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液氮超低温保存是目前植物种质资源长期保存的理想方法。本文总结了近十年来超低温保存植物材料所取得的主要成果。本文以绿色巴夫藻(Pavlova viridis)和球等鞭金藻(Isochrysis galbana 3011)两种饵料金藻为试验材料,用包埋玻璃化法进行冰冻保存.选择静止初期的藻细胞包埋在含有30‰氯化钠的3%褐藻酸钙胶球中,细胞负载约300万个细胞/胶球,用60% PVS(PVS球等鞭金藻: 30%甘油(GLY)+ 20%乙二醇(EG)+ 10%二甲基亚砜(DMSO),用f/2培养基定容;PVS绿色巴夫藻: 30%甘油(GLY) + 20%乙二醇(EG)+ 10%二甲基亚砜(DMSO)+ 5%聚乙烯吡咯烷酮(PVP),用f/2培养基定容)溶液装载后,用100%PVS溶液进行脱水处理,冻存24h后取出冻存管并迅速投入40 oC恒温水浴中快速化冻约3min,探讨了装载液成分、浓度,装载时间,脱水时间,洗涤液浓度及洗涤时间对球等鞭金藻和绿色巴夫藻超低温保存的影响。结果表明:1.球等鞭金藻,21℃装载60 min,0℃脱水60min,0.5M山梨醇洗涤60min条件下,球等鞭金藻的存活率最高,为45%。2.绿色巴夫藻,21℃下装载180 min,0℃脱水60min,1.0M山梨醇洗涤40min条件下,球等鞭金藻的存活率最高,为40%。与常规的两步法和包埋脱水法相比,包埋-玻璃化法简单、快速且存活率高,在藻类种质保存中有广阔的应用前景。
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