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目的观察胰岛素、罗格列酮及两者联用对糖尿病大鼠脑组织微/小血管中低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)及β-淀粉样蛋白(1-40)(Aβ1--40)表达的影响；探讨药物干预影响糖尿病大鼠脑微/小血管中Aβ1-40清除的机制；观察病程对糖尿病大鼠脑组织微/小血管中Aβ1-40表达的影响。方法(1)将自发性2型糖尿病大鼠(Goto-Kakizaki, GK)按病程分为6月龄及3月龄两组,再将6月龄GK大鼠随机分为对照组(DM6)、罗格列酮干预组(DM6RSG)、胰岛素干预组(DM6Ins)、胰岛素联合罗格列酮干预组(DM6Ins+RSG),3月龄GK大鼠(DM3)作为病程对照组,每组7只。(2)免疫组织化学染色定位检测各组大鼠脑微/小血管上A β1-40及LRP-1的表达；酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测各组大鼠脑组织中Aβ1-40及LRP-1蛋白的表达量；RT-PCR定量检测大鼠脑组织中LRP-1mRNA的表达。(3)所有计量资料以均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS17.0软件包对数据进行单因素方差分析,p<0.05认为差异具有统计学意义。结果(1)大鼠脑微/小血管上A β1-40免疫组化结果：各组大鼠脑微/小血管均可见Aβ1-40阳性表达,阳性反应产物呈棕色位于微/小血管平滑肌和血管内皮细胞处。与DM6组相比,DM6Ins组、DM6RSG组及DM3组Ap1-40阳性表达强度减弱,见图4。与DM6组相比,DM6Ins组、DM6RSG组及DM3组Ap1-40阳性表达血管数均明显减少(P<0.05),见表2。(2)大鼠脑微／小血管上LRP-1免疫组化结果：各组大鼠脑微／小血管均可见LRP-1阳性表达,阳性反应产物呈浅棕色位于微／小血管内皮细胞。与DM6组相比,DM6RSG组及DM6Ins+RSG组LRP-1阳性表达强度增强,见图1。与DM6组相比,DM6RSG组及DM6Ins+RSG组LRP-1阳性表达血管数均明显增加(P<0.01),DM6Ins组阳性血管数无明显变化(p>0.05),见表1。(3) ELISA检测大鼠脑组织中Aβ1-40及LRP-1的表达量：ELISA定量结果显示,与DM6组相比,DM6Ins组、DM6RSG组及DM3组脑组织中Aβ1-40的表达量均明显减少(P<0.05),见图5。与DM6组相比,DM6RSG组及DM6Ins+RSG组LRP-1在脑组织中总的表达量明显增加(P<0.01),见图2A。与DM6组相比,DM6Ins组及DM6Ins+RSG组LRP-1在脑组织细胞膜上的表达量明显增加(P<0.01),但DM6Ins组LRP-1在脑组织中总的表达量无明显变化@>0.05),见图2A和2B。与DM6Ins组相比,DM6Ins+RSG组LRP-1在脑组织细胞膜上表达明显增加(P<0.01),见图2B,但脑组织中总的表达量无明显变化(p>0.05),见图2A。(4) RT-PCR检测大鼠脑组织中LRP-1mRNA表达：RT-PCR结果显示,与DM6组相比,DM6RSG组及DM6Ins+RSG组LRP-1mRNA表达相对光密度值升高,见图3A。LRP-1与GAPDH灰度比值比较,与DM6组相比,DM6RSG组及DM6Ins+RSG组LRP-1mRNA表达的相对灰度比值升高(P<0.05),DM6Ins组脑组织中LRP-1mRNA表达无明显变化(p>0.05),见图3B。结论(1)随糖尿病病程增加,A β1-40在脑微/小血管中沉积明显增多,提示糖尿病病程可加重Aβ1-40在糖尿病脑微/小血管中沉积。(2)胰岛素可促使LRP-1从脑组织细胞胞浆内转移至胞膜并明显减少Aβ1-40在糖尿病大鼠脑组织微/小血管中的沉积。(3)罗格列酮可上调LRP-1和LRP-1mRNA的表达并明显减少Aβ1-40在糖尿病大鼠脑组织微／小血管中的沉积。(4)在糖尿病脑组织中,与胰岛素联用时,罗格列酮表现为增敏胰岛素诱导的LRP-1从脑组织细胞胞浆转移至胞膜的功能。