【摘 要】
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从2017年分离得的29株H9N2禽流感病毒毒株中筛选出4株H9N2 毒株:Ck/Shanghai//97/17(简称:H97),Ck/Jiangsu/514/17(简称:H514),Ck/Jiangxi/1271/17(简称:H1271)和 Ck/Anhui/1
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从2017年分离得的29株H9N2禽流感病毒毒株中筛选出4株H9N2 毒株:Ck/Shanghai//97/17(简称:H97),Ck/Jiangsu/514/17(简称:H514),Ck/Jiangxi/1271/17(简称:H1271)和 Ck/Anhui/1523/17(简称:H1523)构建共表达H9N2的HA、其他亚型HA和NA的真核质粒,即为H9N2 DNA疫苗。我们在SPF鸡上验证了 H9N2 DNA疫苗质粒的免疫效果和攻毒保护效果。此外,还探讨了如何提高H9N2 DNA疫苗质粒的免疫原性。通过本项研究,有如下4点发现:1、单基因、二基因及三基因H9N2DNA疫苗免疫SPF鸡免疫试验结果表明,插入三个基因片段的 H9N2 DNA疫苗质粒(pβH1271N9SH4)的免疫效果优于插入一个基因片段(pβH1271)或者两个基因片段(pβH1271N9)的H9N2 DNA疫苗质粒。2、三基因 H9N2 DNA 疫苗质粒 pβH97N9SH4 和 pβH1271N9SH4以10、25、50和100μg的剂量免疫SPF鸡,二免后,所有免疫鸡中血清抗体均转阳。其中,50和100 μg剂量组在二免第3周的HI抗体效价均能达到25及以上。3、SPF 鸡经 H9N2 DNA 疫苗质粒 pβH97N9SH4 和pβH1271N9SH4免疫后,血清HI抗体效价达到25及以上能够使SPF鸡100%免于H9N2病毒感染。4、三基因H9N2 DNA疫苗质粒系统中H4-HA基因的表达与否对H9N2DNA疫苗的免疫效果几乎没有影响。将H4-HA基因换成富集B型的CpG序列后,能够提高H9N2 DNA疫苗的免疫效果。
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