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目的 建立一种简便、有效、稳定的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染的动物模型，观察该模型动物体内不同时间点各种HBV标志物的表达情况；分别以HBV S区、C区和S区联合C区为靶位，观察细胞体外能有效抗HBV的小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)在动物体内抗HBV的效果。方法(1) 以流体动力学法尾静脉注射BALB／c小鼠不同剂量pcDNA3． 1-HBV(pHBV)，第2天时间分辨免疫荧光分析法(time-resolved immunofluorometric assay,IFMA)检测乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)，确定构建动物模型的pHBV最佳剂量。同样方法注射小鼠最佳剂量pHBV，1周内检测各种HBV标志物，IFMA法检测血清中HBsAg、乙型肝炎e抗原(hepatitis B eantigen，HBeAg)、抗HBs、抗HBe和抗HBc；荧光定量PCR法(fluorogenic quantitative PCR，FQ-PCR)检测血清HBV DNA；免疫组织化学法检测肝组织HBsAg和乙型肝炎核心抗原(hepatitis B coreantigen，HBcAg)。(2) 将pHBV和不同剂量的细胞体外实验证明有效的S区siRNA质粒尾静脉共注射BALB／c小鼠，IFMA法检测小鼠血清中HBsAg，确定最佳干扰剂量。用最佳剂量的S区、C区或S区联合C区siRNA质粒和pHBV共注射小鼠，IFMA法检测血清中HBsAg的表达情况；FQ-PCR检测血清HBV DNA的变化；RT-PCR法检测HBV S-mRNA或HBV C-mRNA的表达水平；并且免疫组织化学法检测siRNA对肝组织内HBsAg和HBcAg表达的影响。结果(1) 小鼠通过流体动力学法注射pHBV后HBV标志物表达达100％，最佳质粒剂量为60μg。在该动物模型中，血清中HBsAg第1天表达达高峰，为108． 88±11． 77 ng／ml，后逐渐降低；HBeAg表达量少；分别在第4天、第5天、第7天检测到抗HBc、抗HBe、抗HBs。HBV DNA滴度第1天亦达高峰，为7． 36×10~4±2． 55×10~4copies／ml后呈下降趋势。免疫组织化学示HBsAg主要呈胞浆内弥漫性分布；HBcAg为核浆型分布，以浆型为主。(2) 将pHBV 60 μg分别和15 μg，25 μg，35 μg三个剂量的S区siRNA质粒尾静脉共注射BALB／c小鼠，1天后，静脉采血测HBsAg，分别为28． 22±2． 24 ng／ml，4． 62±0． 18 ng／ml，16． 58±1． 39 ng／ml，与仅注射pHBV 60 μg小鼠HBsAg108． 88±11． 77 ng／ml比较，抑制率分别为74％，96％，85％。可见，合