秦岭山区中国大鲵增殖放流评价及性别识别初步研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:S20090908
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通过增殖放流来复壮濒危野生动物资源已成共识,在鱼类、鸟类等领域已取得显著效果。作为两栖类的中国大鲵(Andrias davidianus),已在历史分布区开展过数次增殖放流,但由于缺乏科学的指导,增殖放流效果并不明显。为掌握适生区放流中国大鲵的野外活动规律、野外存活及生长状况,查明制约中国大鲵增殖放流的主要制约因素,本研究首先选择在秦岭南坡陕西省宁陕县东河流域和秦岭北坡的陕西省周至县黑河流域,创新性地借助无线电遥感技术开展了中国大鲵增殖放流后的实时跟踪监测研究工作;同时,合理的性别比例是增殖放流中国大鲵成功的保障,但中国大鲵由于性成熟晚,加之非繁殖季节性特征不明显等原因,导致放流具有很大的盲目性,因此本研究相继从性别差异表达基因和尿液中性激素组成特点为出发点,开展了中国大鲵性别快速识别方法的相关研究工作,对制约增殖效果的中国大鲵性别识别方法进行了初步探索,旨在通过本研究突破因放流中国大鲵性别识别困难带来的性别比例不当问题,助力中国大鲵的增殖放流和野生资源的复壮。本研究的主要结果如下:1.经过14个月的实时无线遥测跟踪研究,对比分析黑河、东河流域的放流中国大鲵成活率和生长情况,结果显示黑河流域放流的中国大鲵成活率(40.5%)低于东河流域(70.2%)。对存活率影响因素分析结果显示,DSR(手术至放流天数)和Site(放流地点)是影响放流中国大鲵野外存活率的主要因素(ΔAICc<2)。监测结果表明,放流中国大鲵的体长、体重跟人工养殖的同种群相比体重偏轻,但差异不明显;健康状况检查发现,放流前后均无寄生虫和病毒性类疾病,仅在放流早期发现个别个体局部有划痕伤,但后期都慢慢自愈;两放流点的饵料丰度调查结果显示,黑河流域明显大于东河流域(p<0.001)。2.放流中国大鲵时空分布研究共获得5,939个位点信息,数据分析结果表明其中有4,441个位点信息来自东河放流点。东河放流的中国大鲵的静止率、平均日移动距离和家域因季节不同而不同,冬季静止率较高、移动距离较短,家域较小,夏季相反;春、秋季监测指标介于冬、夏季之间,差异不明显。扩散模式研究结果表明,东河放流中国大鲵的平均扩散距离是145.3±61.9 m,黑河两尾幸存中国大鲵的扩散距离是211 m和205 m,所有向下游活动的个体,都与洪水影响有关。此外,本研究还依据运动生态学原理,使用混合模型分析法进一步对可能影响放流中国大鲵移动的体重、体况、温度、降水和月相因素分析结果表明,影响中国大鲵移动的三个环境因素为月相、水温和降水量。体重和体况对放流中国大鲵的移动没有显著影响。本研究揭示了影响放流中国大鲵移动的环境因素,可以为山区开展中国大鲵的放流和保护提供更好的建议。3.本研究利用RNA-seq技术对不同性别中国大鲵性腺进行测序分析,发现在精巢和卵巢组织中共有15,063个差异表达的基因(DEGs),其中7,973(52.93%)个在精巢中高表达,7,090(47.07%)个在卵巢中高表达。选出20个性腺特异表达基因,利用q PCR技术在性腺中进行验证结果与RNA-seq测序结果一致。根据基因表达丰度选取其中13个雌雄性腺特异基因在不同性别中国大鲵的肌肉、皮肤组织中进行定量检测,结果显示这13个特异表达基因在肌肉和皮肤组织中均有表达,且部分基因特别是Msp(β-微精蛋白)在中国大鲵肌肉组织中有显著差异(p<0.05)。检测肌肉中Msp表达可能成为中国大鲵性别识别的潜在标志物。4.另外,采用酶联免疫(EIA)方法对采集的中国大鲵尿液中的睾酮(T)和雌酮-3-葡糖苷酸(E1G)进行检测,结果显示在所有雄性中国大鲵尿液中T平均含量均显著高于E1G(p<0.05),而雌性中国大鲵尿液中T平均含量均显著低于E1G(p<0.05),其中雄性成体中国大鲵尿液中T/E1G比值>1.0;在雌性成体中国大鲵尿液中两种激素比值<1.0。T/E1G判别亚成体中国大鲵性别的准确率为83.33%。雌雄中国大鲵尿液中的差异显著的T/E1G的比率为今后开展中国大鲵性别识别提供了新的思路,亦为增殖放流的中国大鲵性别的准确识别奠定了基础。综上,本研究针对人工增殖放流大鲵开展无线遥感实时跟踪监测,掌握了放流中国大鲵野外存活及生长状况、时空分布、野外迁移能力、家域活动范围,完成了影响其野外移动因素的分析;其次,针对增殖放流中性别识别制约问题,采用非损伤或损伤最小采样法进行采样,基于不同性别中国大鲵性腺转录组测序和EIA技术,明确了通过特异表达基因或性激素进行中国大鲵性别准确识别的可能性,这为下一步开展中国大鲵性别的研究开辟了新的方向。
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