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背景目的:宫颈癌是临床上常见的妇科恶性肿瘤之一,严重威胁着我国广大妇女的健康。近几年来研究表明,宫颈癌的患病率有着上升、年轻化趋势,虽然目前宫颈癌的早期筛查的普及及疫苗的研制有利于减少发病率,但死于宫颈癌的复发及转移的患者仍然居高不下,而癌细胞的侵袭、转移是直接影响到宫颈癌预后的首要威胁。国内外已有大量学者研究发现并且证实宫颈癌是一种多基因、多因素所致疾病,然而目前宫颈癌仍然缺乏有效的特异性治疗方案。WASF3作为促进增殖、侵袭、转移、抗凋亡因子,广泛参与前列腺癌、肺癌、骨肉瘤、卵巢癌等多种恶性疾病的发生发展。其中人乳头瘤病毒16、18型是宫颈癌发病的重要原因之一,有学者筛查发现WASF3在HPV-16、HPV-18转化区细胞中有不同程度的高表达,提示高危型人乳头瘤病也是通过改变WASF3的表达来促进宫颈癌的发生发展。本文旨在检测WASF3在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变(CIN)及正常宫颈组织中的表达水平,初步探讨WASF3在宫颈癌发病机制中的作用,寻找新的特异性和敏感性更高的宫颈癌诊断标志物,发现更具有针对性的基因治疗靶点,将来有望能通过检测或改变WASF3基因表达达到对宫颈癌疾病早期诊断、靶向治疗及评估预后的目的。研究对象:选择2017-2018年在院手术收集的新鲜宫颈组织,包括患者因子宫良性病变而行全子宫切除术的正常宫颈组织38例(正常组),年龄37~61(49.0±7.0)岁;因宫颈癌前病变行宫颈锥形切除术的宫颈上皮内瘤变38例(CIN组),年龄29~54(42.0±6.0)岁;因宫颈癌而行根治性切除手术的宫颈癌组织56例(宫颈癌组),年龄31~75(52.0±10.0)岁,其中鳞癌32例,腺癌24例,手术前均未接受任何放疗、化疗。所取标本均取得患者及家属同意,且诊断经病理科证实。留取的新鲜组织一部分经PBS清洗后用于提取mRNA和蛋白(置入液氮罐中)进行实时定量荧光PCR和Western Blot,另一部用于免疫组化(至于固定液中后包埋)。研究方法:通过应用实时定量荧光PCR技术(Real time-PCR)、蛋白质免疫印迹技术(Western Blot)、免疫组织化学法(SP法)分别来检测宫颈癌组、CIN组、正常宫颈组三者间的WASF3mRNA表达水平及WASF3蛋白的表达水平。所有数据采SPSS19.0医学统计软件进行分析,数据以均数±标准差表示,各组间用最小显著差异法(LSD)进行分析,以P<0.05为差异有统计学意义。研究结果:1.实时定量荧光PCR技术结果显示:WASF3基因在宫颈癌组、CIN组中mRNA表达水平分别为4.08±1.46、2.19±0.60,显著高于正常组1.11±0.47,差异有统计学意义(P<0.05);而宫颈癌组WASF3mRNA表达水平明显高于CIN组,差异有统计学意义(P<0.05)。2.Western Blot结果显示:WASF3基因在宫颈癌组、CIN组中蛋白表达水平分别为4.01±0.35、2.29±0.16,显著高于正常组1.00±0.10,差异有统计学意义(P<0.05);而宫颈癌组WASF3蛋白表达水平明显高于CIN组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.免疫组化法结果显示:WASF3蛋白在宫颈癌组、CIN组中均为高阳性表达率和表达强度,分别为3.99±1.22、2.16±0.74,显著高于正常组1.00±0.38,差异有统计学意义(P<0.05);而宫颈癌组WASF3蛋白阳性表达率和表达强度明显高于CIN组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究结论:WASF3在宫颈癌组、CIN组中表达明显高于正常组;WASF3在宫颈癌组中表达又显著高于CIN组;提示WASF3在宫颈癌发生发展中发挥重要作用。