文王一支笔对大鼠乙酸型胃溃疡的治疗作用及机制研究

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目的:研究文王一支笔提取物对大鼠乙酸型胃溃疡的治疗作用,并通过对氧化应激、炎症细胞因子和表皮生长因子及其受体等蛋白的检测,探究其可能的作用机制。方法:60只雄性SD大鼠随机分为假手术组,GU模型组,奥美拉唑阳性对照组(3.6 mg·kg-1),文王一支笔低、中、高剂量治疗组(100、200、400 mg·kg-1)。用乙酸注射烧灼法制备GU模型,手术后1 d开始灌胃给药,持续10 d,并观察大鼠精神、饮食和体重等一般情况。分别在给药5 d和10 d后进行样本采集,观察溃疡大体形态,测量并计算各组溃疡面积和溃疡抑制率;肉眼结合HE染色观察溃疡组织病理变化;酶试剂盒检测各组大鼠胃组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠胃组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的含量;免疫组织化学染色(IHC)及蛋白免疫印迹法(WB)检测各组大鼠胃组织中表皮生长因子(EGF)和表皮生长因子受体(EGFR)蛋白的定位和定量。结果:1.一般情况:在5 d阶段,与假手术组比较,GU模型组大鼠精神状态较差,饮食、活动均减少,体重减轻(P<0.05);与GU模型组比较,各治疗组大鼠一般情况均有所好转,体重增加(P<0.05或P<0.01);10d阶段,除假手术组外,各组大鼠活动较前均明显增加,毛发顺滑,饮食基本恢复,与假手术组比较,GU模型组体重减轻(P<0.05);与GU模型组比较,文王一支笔治疗组体重增加(P<0.01或P<0.001)。2.溃疡面积和溃疡抑制率:与模型组比较,文王一支笔治疗组在5 d和10 d阶段,溃疡面积均缩小(P<0.01),溃疡抑制率升高。3.病理形态:除假手术组外,各组大鼠胃内壁均出现类圆形溃疡病灶,在5 d和10 d阶段均肉眼可见;HE染色结果显示,溃疡部位胃黏膜缺损,假手术组大鼠胃黏膜结构完整,胃壁层次清晰,腺体排列整齐;GU模型组大鼠溃疡部位见明显炎性细胞浸润,腺体结构被破坏;文王一支笔治疗组炎性细胞浸润减轻,可见新生肉芽组织,腺体结构趋于正常。4.酶试剂盒结果:在5 d和10 d阶段,与假手术组比较,GU模型组大鼠胃组织中SOD和GSH-PX活力降低(P<0.05或P<0.01或P<0.001),MDA含量升高(P<0.01或P<0.001);与GU模型组比较,文王一支笔治疗组SOD和GSH-PX活力升高(P<0.05或P<0.01或P<0.001),MDA含量降低(P<0.05)。5.ELISA检测结果:在5 d和10 d阶段,与假手术组比较,GU模型组大鼠胃组织中TNF-α和IL-6蛋白含量均明显升高(P<0.01或P<0.001);与GU模型组比较,文王一支笔治疗组TNF-α和IL-6蛋白含量均明显降低(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。6.IHC和WB检测结果:GU发生时,EGF和EGFR蛋白在胃黏膜、溃疡面和炎性渗出中均有表达;在5 d和10 d阶段,与假手术组比较,GU模型组EGF和EGFR蛋白表达增加(P<0.01或P<0.001);与GU模型组比较,在10 d阶段,文王一支笔治疗组EGF和EGFR蛋白表达进一步增加(P<0.05或P<0.01)。结论:文王一支笔对大鼠乙酸型胃溃疡具有治疗作用,其机制可能与减轻氧化应激损伤和炎症损伤,提高EGF和EGFR蛋白表达,促进受损胃黏膜修复有关。
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