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神经损伤后的再生是一个连续的损伤修复过程，包括损伤轴突的再生、髓鞘的形成、突触连接的重新获得以及神经功能的最终恢复。哺乳动物神经的再生仅限于周围神经系统，中枢神经系统的神经元几乎不具备再生能力。对损伤周围神经再生机制的研究为进一步阐明损伤后周围神经功能的恢复、进而为中枢神经再生研究提供有利的理论依据和实验基础。 雪旺氏细胞是周围神经系统的髓鞘形成细胞，在PDGF-BB的刺激下表达PDGFβ受体，伴随细胞的增殖。由于雪旺氏细胞能合成神经营养因子，在轴突切割术后仍能存活，提示其在后来的轴突再生中发挥重要作用。然而，这些细胞如何存活及促进神经再生仍然未知。 PDGFs是一个具有多种功能的生长调控分子，在胚胎发生、神经发育以及肿瘤形成等生理和病理过程中发挥重要作用，近年来随着基因敲除技术的发展和应用，PDGF在胚胎发生和中枢神经系统中的作用已被广泛证实。然而PDGF在周围神经系统中的作用尚未见报导。 本研究应用大鼠坐骨神经切割伤和碾压伤模型，系统分析和比较了不同损伤类型、损伤不同区段，从损伤开始至第28天PDGF-B在损伤轴突和雪旺氏细胞中的表达规律，旨在阐明PDGF-B在周围神经再生中的作用。 所得结果如下： 1、Northern印迹杂交显示：与对照组比较两类坐骨神经损伤模型在不同区段和时间内PDGF-B链mRNA的表达呈不同水平的增高。杂交信号强度定量分析显示，除碾压伤3天外，所有样本PDGF-B链mRNA的表达均明显增高，最高峰在切割伤7天和碾压伤28天（250±94.5pg/g和173±89.7pg/g）。<WP=84>两类损伤模型中，取自三个部位的神经中以D1段表达最高。D1段在损伤后3天PDGF-B链mRNA表达增高，并一直持续在高水平。在切割伤模型中维持在340pg/g左右；在碾压伤模型中维持在240pg/g左右。D2段分别在碾压伤和切割伤的第3天和第28天达高峰，碾压伤（194±67.8pg/g），切割伤（185±52.2pg/g）。 2、免疫组织化学染色证实：正常轴突、髓鞘中雪旺氏细胞的胞浆及髓鞘内可见一定量PDGF-B的表达；坐骨神经损伤后第1天开始，两类损伤模型中P1段的肿胀轴突内PDGF-B的表达均增加；在碾压伤3天后，再生轴突中PDGF-B的表达明显增加，并在第28天时恢复至正常水平。 3、雪旺氏细胞中PDGF-B的表达结果显示：两类损伤模型中均可见远端的雪旺氏细胞在损伤第3天及3天后增生，强免疫反应产物定位于雪旺氏细胞的肿胀胞浆内，在损伤7天的远端神经片段表达最为明显。在碾压伤模型中，随着轴突的再生，雪旺氏细胞免疫反应信号强度减弱，但神经远端在第28天时仍维持在正常水平；而在切割伤中，第28天时信号强度明显降低，绝大多数雪旺氏细胞呈弱阳性。 4、碾压伤神经中PDGF-B的免疫组织化学特性：应用不同抗体检测PDGF-B和碾压神经成分的关系，进一步观察碾压伤7天后D1段神经的连续横切切片中PDGF-B的表达特性。PDGF-B在再生轴突（GAP-43阳性）中呈点状分布。PDGF-B的细胞内反应产物主要见于S-100染色弱阳性的细胞，与再生轴突无关（GAP-43阴性），ED1全部为阴性，提示强阳性反应细胞为雪旺氏细胞，而无相应的再生轴突。部分ED1阳性巨噬细胞表达PDGF-B，但阳性细胞极少。 5、PDGF-B的表达与细胞增殖之间存在着时空相关性：与对照组相比，损伤7天后的所有D2段神经PCNA的标记指数显著增高（p<0.0001）。D2段中PCNA标记的非神经细胞均在两种损伤后的第7天达高峰，碾压伤中为28.3±5.79%，切割伤中为30.9±4.66%；此后PCNA阳性细胞数在两种损伤模型中均逐渐降低。碾压伤中，第21天仍维持在10.7±2.81%，28天时为<WP=85>8.66±2.45%；而在切割伤中，21天时降至3.78±1.18%，28天时为3.14±2.28%。切割伤后21天PCNA的标记指数在所检测的所有标本中最低，两种损伤模型损伤21天后?PCNA的标记指数明显不同（p<0.0001）。 以上结果提示： 1、PDGF-B在正常坐骨神经轴突和雪旺氏细胞中呈一定量的表达，提示PDGF-B与轴突、雪旺氏细胞等正常周围神经的结构、机能维持有关。 2、损伤轴突和再生轴突的远端PDGF-B大量积聚，证实PDGF-B的顺向性轴突运输。 3、神经损伤后远端雪旺氏细胞大量增殖并合成和表达PDGF-B，提示神经损伤后PDGF-B表达增强和轴突的再生与雪旺氏细胞的活性化有关。 4、肿胀雪旺氏细胞胞浆中PDGF-B的表达增加受轴突接触调控，PDGF-B在保持和/或建立雪旺氏细胞-轴突联系中起重要作用。 5、PDGF-B作为神经营养因子，一方面维持神经细胞生存和轴突的延长，另一方面作为雪旺氏细胞的生存、增殖因子而起作用。 我们研究证实，PNS损伤中PDGF-B的增加可通过作用于雪旺氏细胞和神经元成分诱导损伤后的PNS再生。此外，PDGF-B在正常及损伤修复后的神经轴突和雪旺氏细胞中的定位提示其可能在轴突-雪旺氏细胞相互作用中发挥重要的信号传导功能。PDGF-B广泛表达于CNS神经元及雪旺氏细胞，为进一步研究其在中枢神经系统再生中的功能意义提供了依据。 本研究的主要创新点及意义： 1、成功建立了大鼠坐骨神经切割伤和碾压伤模型，不但为研究PDGF-B在周围神经再生中的作用提供了可靠的实验模型，也为进一步研?