ADAMTS-18基因沉默和过表达对肝癌细胞系MHCC-97H和HepG2增殖和侵袭能力的影响

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:uuuuurzm
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目的:探讨ADAMTS-18基因对肝癌细胞系MHCC-97H、Hep G2体外增殖和侵袭能力的影响。方法:收集2016年经广西医科大学第一附属医院肝胆外科手术治疗和病理诊断为HBV阳性原发性肝细胞癌的癌组织与癌旁组织标本共62对。(1)用Trizol法分别提取癌与癌旁组织总RNA,分别利用q RT-PCR和免疫组化染色技术检验癌组织与癌旁组织中ADAMTS-18的m RNA和蛋白的表达水平差异,并结合患者临床病理特征做相关性分析。(2)提取MHCC-97H、Hep G2和HL-7702细胞系的总RNA,利用q RT-PCR检测细胞系中ADAMTS-18基因的m RNA表达量。(3)应用慢病毒介导的基因沉默和过表达技术分别构建MHCC-97H、Hep G2、HL-7702细胞系的ADAMTS-18基因沉默和表达稳转细胞株,并通过q RT-PCR和Western blot检测沉默和过表达效率。(4)应用MTT法、细胞划痕实验和Transwell小室体外侵袭实验分别检测ADAMTS-18基因沉默和过表达前后肝癌细胞系的体外增殖和迁移侵袭能力的变化。结果:(1)在HCC癌组织中的ADAMTS-18 m RNA水平和蛋白表达水平均显著高于癌旁组织(P<0.05);(2)ADAMTS-18 m RNA在HL-7702、MHCC-97H、Hep G2、SMMC-7721、BEL-7404和QGY-7703细胞系中均有表达。(3)成功构建ADAMTS-18沉默和过表达的稳转细胞株MHCC-97H、Hep G2、HL-7702。(4)细胞划痕实验和Transwell小室侵袭实验结果显示,上调ADAMTS-18的表达后,MHCC-97H、Hep G2的侵袭能力显著提高(P<0.05);在下调ADAMTS-18的表达后,MHCC-97H的侵袭能力明显降低(P<0.05)。(5)MTT方法检测结果发现,上调或下调ADAMTS-18的表达后,MHCC-97H、Hep G2、HL-7702细胞系的增殖能力随之明显升高和下降(P<0.05)。结论:1、ADAMTS-18基因在HBV相关性HCC癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织;2、上调ADAMTS-18基因的表达可促进MHCC-97H的体外迁移侵袭能力;下调ADAMTS-18基因的表达能抑制MHCC-97H的体外迁移侵袭能力;3、上调ADAMTS-18基因可促进MHCC-97H、Hep G2和HL-7702细胞系的增殖能力。下调ADAMTS-18基因可抑制上述细胞系的增值能力。
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