人参粗蛋白提取及酶解产物的研究

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针对人参蛋白的提取采用了一种简便和高效的方法,为工业化提取人参皂苷后合理利用废弃产物提供依据。以提取的人参粗蛋白为基础采用可控酶解技术,对酶解过程进行研究,利用正交分析选出最优的提取工艺。采用小分子量凝胶电泳技术研究酶解后产物的分子量分布并且对酶解后产物的生物活性进行了简单讨论。最后讨论了吉林省人参产业在现阶段发展的主要问题和解决问题的方法。主要研究结果如下:1.人参粗蛋白的提取。利用D-101型大孔树脂和001×7阳离子交换树脂的组合提取人参粗蛋白,经过测算在大孔树脂有效的吸收范围内添加大孔树脂量,如果增加会对人参粗蛋白的提取有明显影响,在有效范围内不会影响人参皂苷的提取还可以有效提取人参粗蛋白。2.采用单因素和正交实验的结合讨论人参粗蛋白酶解工艺的最佳组合。木瓜蛋白酶最佳酶解工艺条件是温度为55℃、pH值为7、酶用量为4%、时间为4h。中性蛋白酶最佳酶解工艺条件是温度为55℃、pH值为6、酶用量为4%、时间为3h。3.小分子量凝胶电泳显示:提取的人参粗蛋白分子量集中在71kDa-50kDa和35kDa-25kDa之间,在35kDa-25kDa中人参蛋白含量丰富。经过酶解后集中在71kDa-50kDa之间的条带消失,35kDa-25kDa之间的蛋白含量也有所减少,转而下移到16kDa以下,这表明人参蛋白有明显的酶解现象,并且产生小分子量的多肽和氨基酸的混合物。4.通过对酶解产物的活性研究表明:人参粗蛋白的酶解产物对自由基的清除、抑菌、和功能性氨基酸含量等方面有着相关活性。中性蛋白酶酶解产物(10mg/ml)对DPPH自由基的清除率达到92.50%,木瓜蛋白酶酶解产物(10mg/ml)对DPPH自由基的清除率达到89.91%。清除羟自由基方面,中性蛋白酶酶解产物(10mg/ml)对羟自由基的清除率达到83.17%,木瓜蛋白酶酶解产物(10mg/ml)对羟自由基的清除率达到87.61%。抑菌方面10mg/ml的木瓜蛋白酶酶解产物的抑菌率达到40.248%,而中性蛋白酶在高浓度时抑菌效果表现不好,但在低浓度时(2.5mg/ml)时抑菌率达到24.319%。Y-氨基丁酸(GABA)含量方面,人参粗蛋白的含量为7.8%,随着酶解过程逐渐的深入GABA含量有所增加,中性蛋白酶的酶解产物GABA含量为8.1%,木瓜蛋白酶的酶解产物GABA含量为8.3%。
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