【摘 要】
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为了获得同时过量表达SOD和APX的双价转基因烟草植株,该文以抗旱性强的小麦品种旱丰9703为材料,克隆了小麦叶绿体CuZn-SOD和APX基因并对烟草进行了相应的转化工作,研究结果如
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为了获得同时过量表达SOD和APX的双价转基因烟草植株,该文以抗旱性强的小麦品种旱丰9703为材料,克隆了小麦叶绿体CuZn-SOD和APX基因并对烟草进行了相应的转化工作,研究结果如下：1.根据Genebank上登记的小麦叶绿体SOD基因序列设计了一对引物,以小麦叶片为材料提取RNA用RT-PCR法进行目的基因的扩增.得到了一个约800bp的片段.经测序分析并且与已知序列比较,二者同源性高达99.6﹪,但该基因3端非编码区比已知基因短80bp.2.把获得的SOD基因与含35S启动子的pBIH载体重组,构建了正、反义表达载体,并利用农杆菌介导法转化烟草.PCR和Southern杂交证明目的基因已经整合到烟草基因组中.3.根据类囊体膜结合型APX的氨基酸保守序列设计兼并引物,以小麦叶片为材料利用RT-PCR法得到了一个约680bp的基因片段.4.根据获得序列设计引物进行3和5RACE-PCR,得到了该基因的3和5序列.
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