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临床上对巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)进行成功的抗病毒药物抢先治疗(preemptive therapy)有赖于灵敏、特异、重复性高的巨细胞病毒定量检测手段,目前临床上采用CMV pp65抗原血症(pp65-antigenemia)检测,即pp65抗原阳性的外周血白细胞计数来指导巨细胞病毒的抗病毒药物治疗。近年来临床研究和实践表明,应用实时多聚酶链反应(real-time polymerase chain reaction,PCR)方法对CMV-DNA进行定量检测,比pp65抗原血症(pp65-antigenemia)检测更灵敏、重复性更高。由于CMV基因的多态性和高突变率,通用的标准CMV定量PCR检测方法尚未建立。本课题使用基于TaqMan探针的荧光实时PCR技术,建立了快速、灵敏定量检测巨细胞病毒的方法,并形成检测试剂盒。本试剂盒选用CMV基因UL83(产物为pp65)的保守序列设计引物和探针,应用荧光PCR原理定量检测标本中病毒载量。该试剂盒特异性好,线性检测范围为200~3.6E+9copies/ml,灵敏度为200copies/ml,重复性达到CV%值~1%。检测24份CMV阳性标本和31份CMV阴性标本,结果与临床符合率为100%。通过对器官移植患者、孕期妇女和体检人群或献血员三大类群大量标本检测来考察检测系统与临床其它指标关系,显示该检测体系适宜推广应用于临床对CMV感染进程的监控。