脂易消对NAFLD大鼠脂肪细胞因子Visfatin表达的影响

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目的本实验以脂肪细胞因子Visfatin为研究靶点,采用中医验方脂易消对NAFLD大鼠模型进行干预,以中医理论为指导,运用蛋白、基因表达等现代科学技术手段,对NAFLD的痰湿内停证进行辨治规律的研究,运用分子生物学、病理形态学等手段观测其血清生化指标、肝脏组织学变化,并重点观测脂肪细胞因子Visfatin的蛋白表达和基因表达水平的变化,监测不同浓度脂易消对NAFLD大鼠模型Visfatin mRNA、蛋白表达的影响,从蛋白、基因等角度揭示NAFLD痰湿内停证的实质,探讨NAFLD的发病机理和中医药治疗NAFLD的作用机制,有助于从分子生物学水平明确NAFLD的诊断,从而为今后建立NAFLD的客观的辨证体系和中医临床诊断标准奠定基础。方法本实验采用高脂饲料喂养制备NAFLD大鼠(痰湿内停证)模型。将60只雄性SD大鼠随机分成A、B、C、D、E、F6组,每组10只。A、B、C组分别为脂易消低、中、高剂量治疗组(简称低、中、高剂量组),D组为易善复胶囊阳性对照组(简称易善复组),E组为阴性对照组(简称模型组),F组为阳性对照组(简称正常组)。A-E组均给予高脂饲料喂养,F组给予普通饲料喂养。在实验期间,分别给予不同的干预,即A、B、C组分别灌以相当于成人临床用量3、6、12倍的脂易消水溶液,D组灌以相当于成人临床用量6倍的易善复胶囊混悬液,E和F组均灌以同等容量的0.9%生理盐水。造模并干预12周后处死大鼠,称量肝湿重;取血和肝组织,用于检测血清肝功能、血脂、游离脂肪酸及肝匀浆的血脂和胆固醇水平;镜下观察肝组织病理形态改变;采用ELISA法检测Visfatin蛋白表达水平及RT-PCR法检测肝脏中Visfatin mRNA表达水平。结果血清学检测结果显示脂易消各剂量组及易善复组与模型组大鼠相比均有显著性差异(P<0.01,P<0.05);肝脏组织匀浆TC、TG检测脂易消各剂量组及易善复组的肝细胞内脂肪沉积也较之模型组明显减轻(P<0.05);脂易消各剂量组大鼠肝组织内肥素mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01,P<0.05),但与易善复组相比,各剂量治疗组则无显著性差异(P>0.05)。结论一定浓度的脂易消可以显著调节NAFLD大鼠的体内脂质代谢紊乱、减缓肝脏炎症发生、改善肝脏功能,同时能够降低肝组织内Visfatin mRNA及蛋白表达水平,对高脂饮食所导致的NAFLD有治疗作用,其疗效与易善复相似而无较大的副作用。中药验方脂易消对NAFLD的痰湿内停证有较好的疗效,结合临床情况,加减可广泛应用于临床。
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