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目的:观察水蛭地龙提取液对大鼠局灶性脑缺血后脑组织的炎性浸润和 NF-κB 的表达及脑组织 TNF-α、IL-1β、MCP-1 含量的影响,以探讨水蛭地龙提取液对脑缺血后炎症反应的影响。 方法:采用自体血栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞的脑缺血模型,并用水蛭地龙提取液干预。在不同时间点,用免疫组织化学方法测定NF-κB 的蛋白表达水平;用 ELISA 方法测定脑组织 TNF-α、IL-1β、MCP-1 的含量变化;用 HE 染色光镜观察缺血区及周围组织的炎症反应情况。参照 Berderson’s 法对神经功能缺损体征评分。 结果: 1. 假手术组缺血侧脑组织 HE 染色观察到浸润白细胞极少;模型组白细胞数在 1d 明显增加,2d 达高峰,3d 有所下降,5d 仍有较多白细胞浸润;干预组相应各时间点白细胞浸润明显减少,以 3d 最明显。 2. 模型组缺血侧脑组织 NF-κB 阳性细胞在 1d 即达高峰,2d、3d稍下降,5d 明显下降,与假手术组比较各时间点均显著增高(P<0.05)。干预组,NF-κB 阳性表达规律与模型组类似,但相应各时间点的阳性表达明显减少,两组比较有显著性差异(P<0.05)。 3. 模型组缺血侧脑组织 TNF-α的含量在1d 明显增加， 达高峰， 2d3d、5d 仍有较高含量，与假手术组比较各时间点均有显著性差异(P<0.05)；干预组相应各时间点 TNF-α的含量明显减少(与模型组比较P<0.05)，3d 时更明显。 4．模型组缺血侧脑组织 IL-1β在 1d 明显增加，2d 达高峰，5d 明显减轻(与假手术组比较, P<0.05)；干预组相应时间点的 IL-1β含量明显减少，以 2d、3d 较为显著(与模型组比较，P<0.05)。 5．模型组缺血侧脑组织 MCP-1 的含量 1d 明显增加，2d 达高峰3d 仍较高，5d 有较明显的减轻(与假手术组比较, P<0.05)；干预组在各时间点脑组织 MCP-1 的含量均明显降低，与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。 结论：水蛭地龙提取液可减轻脑缺血后白细胞的浸润，减少缺血脑组织中 NF-κB 的表达，并降低缺血脑组织中细胞因子 TNF-α、IL-1β、MCP-1 的含量。水蛭地龙提取液有抗炎症损伤作用，可能与其抑制脑缺血后 NF-κB 及 TNF-α、IL-1β、MCP-1 的蛋白表达有关。重庆医科大学硕士研究生学位论文 4第二部分局灶性脑缺血自由基损害干预的实验研究摘 要目的:通过观察大鼠脑缺血后脑组织 MDA 的含量及 SOD、 NOS活性的变化,探讨水蛭地龙提取液是否有抗氧化应激的脑保护作用。方法:采用自体血栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞的局灶性脑缺血模型,并用水蛭地龙提取液干预。在不同时间点,用生化方法检测脑组织 MDA 含量及 SOD、NOS 活性的变化。结果:1. 模型组缺血侧脑组织 MDA 的含量在 1d 已明显增加5,d 达最高,与假手术组比较有显著性差异(P<0.05);与模型组比较,除 1d 外,干预组在各时间点 MDA 的含量明显减少(P<0.05)。2. 模型组缺血侧脑组织 SOD 的活性 1d 最低,后渐增高,5d 仍与假手术组有明显差异(P<0.05);干预组与模型组比较,在各时间点 SOD活性明显增加(P<0.05)。3.模型组缺血侧脑组织总 NOS 及 iNOS 的活性在 1d 明显升高,2d 达高峰,3d、5d 有所降低但仍明显高于假手术组(P<0.05);干预组与模型组比较,各时间点总 NOS 及 iNOS 活性明显降低,差异有显著性(P<0.05)。