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磷是植物生长的必需元素之一,但同时也是水体的污染源。滇池富磷区土壤中的磷素通过径流等途径冲刷入湖,是滇池水体磷富营养化的成因之一。发掘该区域土壤中的解磷微生物资源及研究其多样性对于解磷菌肥的研制及其在该区域农业种植中的应用具有重要意义。本研究分离了一批来自滇池流域富磷区土壤中的解磷细菌;测定其解磷能力;分析其系统发育关系;从解磷细菌中筛选出具有趋化特性的类群;通过盆栽实验分析了解磷细菌对植物的促生效果;获得以下主要研究结果:
1.从滇池流域富磷区的100份土壤中通过特异性培养基筛选和解磷能力的定量、定性测定,获得377株对Ca3(PO4)2具有较强溶解能力细菌,其中,145(10.92%)株解磷菌在NBRIP培养基上能形成直径0.5-2 cm的水解圈。这377株解磷细菌溶解Ca3(PO4)2时,其培养液中可溶性磷含量在33.48-69.63 mg L-1之间。解磷细菌的解磷活性与其形成的解磷圈大小及其培养液pH无明显相关性。
2.通过RFLP-16S rRNA分析方法明确了滇池富磷区解磷细菌的种类主要分属变形菌门(Proteobacteria),放线菌门(Actinobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes)中的13个属:伯克霍尔德菌属(Burkholderia),假单胞菌属(Pseudomonas),不动杆菌属(Acinetobacter),肠杆菌属(Enterobacter),泛菌属(Pantoea),沙雷氏菌属(Serratia),克雷伯杆菌属(Klebsiella),勒克氏菌属(Leclercia),拉恩菌属(Rahnella)和西地西菌属(Cedecea),芽孢杆菌属(Bacillus),短杆菌属(Brevibacterium)和节杆菌属(Arthrobacter)。
3.解磷能力较强的解磷细菌Lclercia adecarboxylata I、PseudomonasmediterraneaⅡ、Enterobacter amnigenusⅢ及其混合菌对油菜的根长、株高、叶片直径、鲜重和干重具有显著促生作用,促生率分别为33.9-181.5%,74.7-140.6%,24.4-94.0%,125.7-426.7%和71.4-492.7%。
4.通过组氨酸激酶基因(CheA)筛选及琼脂平板群集和滴定试验,筛选出37株对邻苯二酚,P-Hydroxybenzoid,水杨酸和L-天冬酰胺四种化合物具有趋化性的解磷细菌。