缺氧、缺氧/复氧和缺糖对皮质星形胶质细胞影响的研究

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目的:该研究从细胞水平、生化水平和基因水平探讨鼠脑星形胶质细胞在缺氧、缺氧/复氧和缺糖损伤情况下所产生的变化,了解其变化规律.为临床上常见脑缺血所造成的脑缺氧、缺糖和脑缺血再灌引起的损伤治疗提供来自神经胶质细胞的理论基础和实践依据.方法:取大鼠大脑皮层星形胶质细胞作为原代培养,传至第四代,制备培养的星形胶质细胞.第一章:按正常糖、低糖和无糖分组作缺氧处理星形胶质细胞;测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、噻唑蓝(MTT)降解率和细胞凋亡率;第二章:按正常糖、低糖和无糖分组作缺氧/复氧处理星形胶质细胞;测定LDH漏出率、MTT降解率和细胞凋亡率;第三章:将星形胶质细胞作缺氧、缺氧/复氧处理,用TRIzol提取各组细胞样本总RNA,采用基因芯片技术获取缺氧、缺氧/复氧处理后鼠脑星形胶质细胞的基因表达谱,利用Gene Ontology Consortium分析系统、GenCards数据库和Genbank对基因表达谱进行初步分析;第四章:将细胞按不同时间分组作缺氧、缺氧/复氧处理,提取处理后细胞某些功能蛋白质,作Western blot印迹实验.
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