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研究背景肌萎缩侧索硬化症(amyotrophiclateral sclerosis,ALS)是慢性进展性神经系统变性疾病,其病因和发病机制可与分子遗传机制相关,目前尚无公认有效的现代医学治疗手段。而中医药在治疗本病上存在一定的优势和空间,现代众多医家认为脾肾亏虚是ALS的基本病机,贯穿病程始终。因此运用脾肾同治法治疗ALS,并初步探讨可能的分子学机制及评价其临床疗效具有一定的意义。研究目的通过动物实验应用谷氨酸(glutamic acid,Glu)直接诱导的肌萎缩侧索硬化(ALS)脊髓片模型,初步探讨脾肾同治对于运动神经元的选择性保护作用；同时初步评价脾肾同治对ALS患者治疗前后的运动功能相关指标的影响。研究方法通过动物实验应用谷氨酸(Glu)直接诱导的ALS脊髓片模型,初步探讨脾肾同治对于运动神经元的选择性保护作用；研究脾肾同治方法对于保护脊髓运动神经元免受Glu的神经兴奋性损伤的作用及其机制。以随机对照的方法选取5组SD大鼠,分为对照组、Glu模型组、脾方组、肾方组、脾肾方组,分别服用安慰剂、补中益气汤、右归丸、补中益气汤合右归丸2周,取大鼠脊髓腰膨大部位制作Glu诱导的ALS脊髓片模型,加入相应治疗组的大鼠血清,培养2周,通过倒置显微镜观察运动神经元的形态结构、培养液LDH含量测定和SMI—32标记的运动神经元免疫组化分析等指标来比较运动神经元损害的程度。采用回顾性研究方法,以临床确诊ALS患者为研究对象,脾肾同治法治疗1个月,通过ALSFRS评分量表对治疗前后主要症状积分比较,初步探讨脾肾同治法对ALS患者运动功能相关指标的影响。研究结果本实验在器官型培养的脊髓薄片培养液中持续加入高浓度谷氨酸,通过倒置显微镜观察、免疫组化染色、Hoechst 33258免疫荧光染色、组织培养液LDH含量测定及脊髓组织片活性测定等结果发现Glu模型组脊髓腹角SMI-32阳性的a运动神经元数目减少、脊髓片细胞活性降低和培养液中LDH含量升高(P＜0.05),差异有统计学意义,而背角中间神经元的损伤相对较轻(P＞0.05),差异无统计学意义；而治疗组脊髓腹角背角的神经元数目减少、脊髓片细胞活性降低和培养液中LDH含量升高不明显(P＞0.05),差异无统计学意义。ALS患者治疗前后的ALSFRS总积分比较(P＜0.05),差异有统计学意义；ALS患者治疗后的言语、流涎、吞咽、独立进食、床上翻身、行走、呼吸等症状积分与治疗前相比较(P＜0.05),差异有统计学意义；ALS患者治疗后的书写、穿衣、登楼等症状积分与治疗前相比较(P＞0.05),差异无统计学意义。研究结论通过动物实验应用谷氨酸直接诱导的ALS脊髓片模型的初步研究结果表明,细胞外、突触间隙中高浓度Glu产生了兴奋毒,造成了运动神经元的损伤,使SMI-32阳性的a运动神经元数目减少、脊髓片细胞活性降低；而脾肾同治法对于细胞外、突触间高浓度Glu引起的运动神经元损伤有保护作用,能够延缓疾病的进展。通过ALSFRS评分量表对治疗前后ALS患者主要症状积分的比较,初步提示治疗1月后,患者的言语、流涎、吞咽、独立进食、床上翻身、行走和呼吸等症状功能得到改善,表明脾肾同治法可改善ALS患者症状,延缓疾病的进展。