本文从以下两部分进行了阐述：　　第一部分 中国猕猴结核模型建立的实验研究　　结核病是由结核分枝杆菌引起的呼吸道传染病，是仅次于免疫缺陷病毒的第二大传染病杀手。世界上有三分之一的人感染了结核分枝杆菌，这些人群都是结核病传播的潜在来源。结核病的发病率和死亡率居高不下，BCG疫苗对成人肺结核有限的保护作用以及耐多药结核菌株的出现使得新型有效的疫苗和抗结核药物的研发迫在眉睫。而疫苗和药物的有效性和安全性的测试亟需合适的动物模型进行评价。与其他结核动物模型相比，非人灵长类模型具有无可比拟的巨大优势。本研究中，分别感染中国来源的恒河猴和食蟹猴，以期建立不同种属的非人灵长类动物模型，可以模拟与人类疾病类似的完整的疾病谱，包括活动性感染和潜伏感染。　　一 结核分枝杆菌感染中国恒河猴的实验研究　　通过纤维支气管镜分别以25CFU、100CFU和500CFU菌量的结核分枝杆菌Erdman株感染24只中国恒河猴。动物感染后，连续观察其临床症状（食欲、咳嗽症状、测量体温和体重），进行血液学的检查（包括血沉和C反应蛋白）和胸部X光的影像学检测。在预订的时间点对动物实施安乐死，取感染组织进行组织细菌载量的检测和病理学检测和分析。无论感染菌量大小，所有动物经PPD皮肤试验检测均为阳性，显示感染成功。中国恒河猴对结核菌非常敏感，感染后均进展为急性活动性结核病，疾病表现与进程与结核患者非常类似。组织病理学结果显示，多个组织均可见结核性肉芽肿，提示结核感染不仅仅局限于肺部病变，还扩散累及多个组织器官，包括胸膜、心、肝、脾、肾脏、多处淋巴结甚至睾丸，抗酸染色均可见结核菌。并且还观察到所有的肉芽肿类型，包括细胞型肉芽肿、干酪样肉芽肿以及肉芽肿的纤维化、钙化等现象。组织细菌载量检测显示，右肺载量高于左肺，但组间无剂量依赖性。相关性分析结果表明，感染动物的临床指标和影像学结果与疾病严重程度有明显的相关性。这些结果说明中国恒河猴是非常好的结核活动性感染模型，可用于结核发病机制的研究和评价新型疫苗和药物。　　二 结核分枝杆菌感染中国食蟹猴的实验研究　　本实验室前期实验显示，恒河猴对结核菌非常敏感，即使是低剂量的结核菌感染也进展为活动性结核，并且在相对较短的时间内死亡。有报道证实，食蟹猴对结核杆菌的耐受性比恒河猴更强。因此有必要采用这种耐受性更高的食蟹猴建立结核模型以期能模拟人类感染结核后不同的疾病状态如潜伏感染。采用结核分枝杆菌Erdman株感染8只中国来源的食蟹猴，将不同菌量（25CFU和500CFU）的结核菌通过纤维支气管镜滴入动物右下肺叶。感染后，连续动态监测动物临床表现，胸部X光和计算机断层扫描（CT）检查肺部病变。用旧结核菌素皮肤试验（TST）和联合酶联免疫斑点(ELISPOT)检测疾病进程中的结核菌特异性免疫学反应。TST的阳性结果显示所有动物均成功被感染。8只动物中有4只进展为活动性结核，在感染后8-15个月死于结核病。其余的动物为潜伏感染，在整个实验期间，仅仅出现TST结果阳性而不表现出任何临床症状，并且影像学检查也未见异常。与结核病人的临床表现一致的是，进展为活动性结核的食蟹猴也可见食欲降低、体重减轻、咳嗽等症状。CT检测观察到肉芽肿病变、空洞形成、肺实变、胸腔积液以及淋巴结肿大和钙化等病变特征均与结核患者非常类似。组织病理学检查观察到不同类型的结核性肉芽肿病变。值得注意的是，首次观察到II型肺泡上皮细胞反应性增生的现象，提示II型肺泡上皮细胞也参与了结核菌导致的肺部损伤的修复机制。II型肺泡上皮细胞增生的部位在肉芽肿的周边，但其机制仍有待深入研究。上述结果说明，中国食蟹猴在低剂量的结核分枝杆菌感染之后能够模拟活动性感染和潜伏感染等不同的疾病状态，可用于潜伏感染的发病机制以及预防治疗的研究。　　第二部 分维生素D辅助抗结核治疗的研究　　目前结核病防治面临巨大挑战，迫切需要新的有效药物治疗肺结核以及缩短目前抗结核药物的疗程。本研究的目的在于将骨化三醇（1,25-二羟基维生素D3，维生素D的活性代谢物）联合一线抗结核药物吡嗪酰胺（PZA）治疗小鼠结核，观察骨化三醇是否能增强PZA的抗菌作用。C57BL/6小鼠气溶胶感染结核分枝杆菌H37Rv，感染后动物随机分为4组，对照组（生理盐水对照），骨化三醇组，PZA组,联合用药组（骨化三醇+PZA）。通过动物结核累及脏器的组织病变严重程度和细菌载量评价骨化三醇对PZA疗效的影响。RT-PCR检测细胞因子（IFN-γ，IL-4）的表达和抗菌肽基因（mBD2，LL-37）的转录水平。ELISA检测IFN-γ分泌。与对照组比较，骨化三醇单独用药对结核几乎没有治疗作用,而PZA可抑制细菌载量和减轻肺部的病理损伤，骨化三醇则能增强PZA的效应。进一步的研究证实骨化三醇显著抑制Th1细胞因子IFN-γ的表达，促进Th2细胞因子IL-4和抗菌肽的基因转录。我们的结果提示骨化三醇可通过抑制炎性应答和上调抗菌肽表达，协同PZA发挥抗结核效应，为骨化三醇辅助抗结核药物的治疗提供了实验数据和线索。