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子宫内膜炎是奶牛产后常见多发病,临床上对该病的治疗以抗生素为主,随着抗生素的过度使用,抗生素残留和病原菌耐药问题日益严重,因此非抗生素疗法成为研究的热点,乳酸菌作为非抗生素疗法之一,引起了人们的重视。但是乳酸菌对该病的防治报道相对较少。因此,本试验从产后40-60 d健康奶牛子宫中分离乳酸菌,通过对乳酸菌的抑菌性、产酸性、产H2O2性、黏附性、耐药性检测、耐药基因检测、安全性、临床治疗有效性等试验评价乳酸菌防治奶牛子宫内膜炎的潜力。研究结果如下:1.乳酸菌的分离鉴定、抑菌试验和黏附试验。采用MRS固体培养基筛选乳酸菌,革兰氏染色,生化鉴定,和16S rDNA鉴定,共分离出8株乳酸菌,抑菌试验发现植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）、副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）以及鼠李糖杆菌（Lactobacillus Rhamnosus）抑菌活性较好。黏附试验发现副干酪乳杆菌黏附子宫内膜上皮细胞能力较好。因此选择这3株乳酸菌用于后续试验。2.乳酸菌益生性和安全性评价。对乳酸菌产酸、产H2O2进行检测,发现3株乳酸菌都具有良好的产酸能力,3株乳酸菌都不具备产H2O2的能力。药敏试验发现,3株乳酸菌均对常用7种抗生素敏感,且能显抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和无乳链球菌的生长。用PCR法检测了乳酸菌的部分耐药基因,结果检测出磺胺类耐药基因sul-2和sul-3,氨基糖苷类耐药基因aphA-1和aphA-2以及β-内酰胺类抗生素耐药基因bla-IMP。大鼠安全性试验结果显示0.1 mL1×1010 CFU/mL能够引起大鼠子宫轻微的炎症。结果表明,3株乳酸菌不会对试验动物造成病理损害,可用于临床试验。3.乳酸菌培养基优化以及活菌制剂的制备。为得到更高浓度的乳酸菌,以MRS为基础培养基通过改变培养基中主要碳源,氮源的浓度,优化乳酸菌培养基。结果显示:改良后的培养基发酵副干酪乳杆菌结束后OD值达由原来的1.250增加到1.331,鼠李糖杆菌发酵结束后OD值由原来的1.314增加到1.396,植物乳杆菌无明显变化。采用L9（34）正交试验设计方法优化冻干包埋剂的最佳浓度组合,植物乳杆菌,副干酪乳杆菌,鼠李糖杆菌按与冻干保护剂按1:1的比例在-40℃真空条件下冻干48 h制成冻干保护剂。结果显示:植物乳杆菌冻干一个月后存活率为92.5%,副干酪乳杆菌存活率为89.7%,鼠李糖乳杆菌存活率为93.3%。4.乳酸菌治疗奶牛子宫内膜炎的临床试验。选择临床型子宫内膜炎患牛20头,随机分为乳酸菌治疗组和对照组,每组10头。用3株乳酸菌活菌冻干剂及其发酵上清液联合治疗。结果显示:治愈率为60%,有效率为90%。