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植物甾醇具有降低血液胆固醇和防治心血管疾病等生理功效。然而因植物甾醇水溶性和脂溶性都非常差，限制了它在食品、医药等领域的应用。将植物甾醇改性成为脂溶性较高的植物甾醇酯则能够拓宽应用范围。目前，植物甾醇酯制备方法主要有化学法和酶催化法。酶催化合成具有反应条件温和、能耗低、产品环保等优点。本论文利用脂肪酶催化合成植物甾醇酯，研究了植物甾醇酯的合成工艺、分离纯化方法以及理化性质。首先建立了植物甾醇酯的气相色谱质谱联用(GC-MS)和气相色谱(GC)分析检测方法。采用GC-MS对酯化产物进行定性分析，确定了植物甾醇酯的生成，并采用GC对植物甾醇酯进行检测。研究有机介质和离子液体微乳液介质对植物甾醇酯酶催化合成的影响，通过单因素实验确定了两种反应体系脂肪酶催化合成植物甾醇酯的最佳工艺条件：在正己烷中，筛选出脂肪酶AYS作为催化剂，底物摩尔比(肉豆蔻酸:植物甾醇)为3:1，脂肪酶AYS添加量为底物混合物的10%，反应温度为50℃，72h肉豆蔻酸植物甾醇酯得率可达到69.93%。在离子液体微乳液体系中，筛选出脂肪酶AY30作为反应催化剂，水分含量w0值为5.4，表面活性剂浓度为300mmol/L，反应温度为50℃，最适PH为7.4，酶加量为底物(月桂酸和植物甾醇)总质量的10%，24h酯化率可达87.80%，该体系在重复利用7次之后酯化率仍然能够达到82.50%。研究了反应粗产物的薄层层析、柱层析和萃取分离方法。根据植物甾醇、月桂酸甾醇酯和豆蔻酸甾醇酯在不同温度条件下不同有机溶剂中的溶解度差异，采用复合溶剂正己烷/异丙醇来萃取分离甾醇酯粗产物，分离效果良好，肉豆蔻酸植物甾醇酯和月桂酸植物甾醇酯的纯度分别可达到95.17%和96.64%，回收率分别为92.35%和90.11%。研究了植物甾醇酯的基本理化性质和在油脂中的溶解度。两种甾醇酯的外观都为白色粉末状，无异味，有淡香味，密度略小于水，难溶于水、乙醇、异丙醇，易溶于正己烷、正庚烷，熔点在85℃左右，酸价低于5mgKOH/g，过氧化值低于1meq/kg，甾醇酯在油脂中的溶解度与植物甾醇的相比提高了3-7倍。