【摘 要】
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目的:验证面神经支配的肌肉和肢体神经支配的肌肉对罗库溴铵的敏感性是否存在差异,观察面神经受损后肌肉对罗库溴铵的药效学改变。探讨不同肌肉对罗库溴铵的敏感性差异是否与神经肌接头大小、肌纤维大小以及烟碱型乙酰胆碱受体(Nicotinic Acetylcholine Receptor,nAChR)亚基的定量、定位和定性改变有关。同时探索不同肌肉nAChR的表达差异和改变是否和agrin/Lrp4/MuSK
【基金项目】
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国家自然科学基金(81271075)National Natural ScienceFoundation of China(81271075);
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目的:验证面神经支配的肌肉和肢体神经支配的肌肉对罗库溴铵的敏感性是否存在差异,观察面神经受损后肌肉对罗库溴铵的药效学改变。探讨不同肌肉对罗库溴铵的敏感性差异是否与神经肌接头大小、肌纤维大小以及烟碱型乙酰胆碱受体(Nicotinic Acetylcholine Receptor,nAChR)亚基的定量、定位和定性改变有关。同时探索不同肌肉nAChR的表达差异和改变是否和agrin/Lrp4/MuSK和NRG1/ErbB信号调节通路有关。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组和面神经损伤组。正常组取左侧口轮匝肌和腓肠肌。在面神经损伤组中通过钳夹产生不同程度的面神经损伤,在造模后1天、3天、7天、14天、30天、60天和90天各时间点,分别进行受损口轮匝肌取材。通过离体药效学检测各组肌肉对罗库溴铵的量效曲线,计算药物半数抑制浓度(50%Inhibitory Concentration,IC50)。通过免疫荧光染色法检测各组肌肉nAChR的α1、β1、δ、ε和γ亚基的表达量和表达位置。通过RT-PCR和Western blot 检测各组肌肉 agrin、Lrp4、MuSK、MMP3、NRG1 β、ErbB2、ErbB3 和 ErbB4的mRNA和蛋白表达。结果:正常口轮匝肌对罗库溴铵的IC50数值大于腓肠肌;正常口轮匝肌在单位横截面积上的乙酰胆碱受体亚基密度高于腓肠肌,同时其肌纤维横截面积(Cross-Sectional Area,CSA)小于腓肠肌,运动终板面积(Endplate Surface Area,ESA)与肌纤维横截面积的比值(ESA/CSA)高于腓肠肌;正常口轮匝肌NRG1β、ErbB2、ErbB3和ErbB4的mRNA和蛋白表达高于腓肠肌,而agrin、Lrp4、MuSK和MMP3的mRNA和蛋白表达没有差异。面神经损伤后,肌肉单收缩张力下降,IC50数值增大,IC50数值与面神经损伤程度呈正相关;nAChR α1、β1、δ、ε和γ亚基在神经肌接头内外大量表达;agrin的mRNA和蛋白表达在面神经损伤后1、3、7、14和30天显著下降,并且与损伤程度呈负相关;Lrp4、MuSK和MMP3 NRG1 β、ErbB2、ErbB3和ErbB4在损伤后表达增加,并且与损伤程度呈正相关。结论:面神经支配的肌肉对肌松药的敏感性低于肢体神经支配的肌肉,其机制不仅和单位横截面积上的nAChR亚基密度有关,还与肌纤维横截面积以及运动终板面积与肌纤维横截面积的比值有关。口轮匝肌中nAChR亚基的高表达与NRG1/ErbB信号调节通路有关,而与agrin/Lrp4/MuSK调节通路无关。面神经受损后口轮匝肌肌张力和对肌松药的敏感性降低,其原因可能与乙酰胆碱受体的定量、定位和定性改变有关。面神经损伤不同程度地激活了 agrin/Lrp4/MuSK和NRG1/ErbB信号调节通路,进而导致nAChR亚基在神经肌接头内外大量表达。
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