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猪繁殖与呼吸综合征(Procine Reproductive and Respiratory Syndrome，PRRS)最早于1987年在美国报道，自爆发以来，给养猪业造成了严重的经济损失。在1995年左右传入中国，引起该病的的病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒(Procine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus，PRRSV)。我匡流行的主要是美洲型PRRSV及其变异株，近些年来中国PRRSV谱系呈多样化趋势，增加了中国对PRRS的预防和治疗的难度。JXA1-lke谱系毒株是PRRS爆发以来比较流行的高致病性PRRSV(HP-PRRSV)，而NADC30-like谱系毒株是近些年流行的HP-PRRSV。通过这两个谱系构建的二价核酸疫苗将是一种非常理想的防控PRRSV的新型疫苗。 从某发病猪场采集样本采集到一株PRRSV，将其命名为YN-LQ株。对其进行全基因扩增，然后对其Nsp、GP5基因和全基因组进行遗传进化分析及同源性比对，并对其Nsp2、GP5基因编码的氨基酸的序列进行比对，证实该YN-LQ株为JXA1-like谱系毒株。对YN-LQ毒株的理化特性进行研究，结果表明，YN-LQ毒株不耐热、不耐酸和碱，对乙醚、氯仿和紫外线敏感，对胰蛋白酶和超声波不敏感。将YN-LQ株的ORF5基因与NADC30-Like的ORF5基因通过自裂解Linker进行连接，再与pVAX1载体连接构建二价核酸疫苗，转染至BHK细胞，用蛋白免疫印迹(Western Blot)等方法进行验证。结果显示，二价核酸疫苗可表达GP5(JXA1-Like)-Linker-GP5(NADC30-Like)目的蛋白。 将所构建的二价核酸疫苗进行小鼠免疫研究，实验结果显示，二价核酸疫苗加佐剂组可提高小鼠的体液免疫和细胞免疫，具有较好的免疫原性。IL-4和IFN-γ细胞因子检测显示免疫35d时，二价核酸疫苗加佐剂组均高于二价核酸疫苗组。中和抗体检测显示免疫35d时，二价核酸疫苗加佐剂组高于其它组，中和抗体滴度最高达1∶17.77。CD3+CD4+和CD3+CD8+血清细胞因子检测结果显示35d时，二价核酸疫苗加佐剂组均高于二价核酸疫苗组。T淋巴细胞增殖实验结果显示:特异性刺激组的刺激指数(SI)高于非特异性刺激组，二价核酸疫苗加佐剂组和二价核酸疫苗组高于其它组。在特异性刺激中，二价核酸苗加佐剂组高于二价核酸疫苗组;在非特异性刺激中，二价核酸疫苗加佐剂组也高于二价核酸疫苗组。 综上，联合佐剂可提高二价核酸疫苗的免疫效果，为美洲型PRRSV疫苗的进一步研发奠定基础。