亚麻饼木酚素发酵提取工艺研究

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木酚素(SDG, secoisolariciresinol diglucoside)是一种天然植物雌激素,具有的多种功能活性,在抗癌、抗氧化、抗肿瘤及抗心血管疾病等方面具有显著作用。亚麻籽种皮中富含木酚素,但是其中也含有生氰糖苷,它在β-葡萄糖苷酶的作用下可生成剧毒的氢氰酸。因此,本课题以亚麻饼粕为研究对象,本着提高产品得率的目的,通过微生物发酵对亚麻木酚素提取工艺研究。在对微生物发酵过后的饼粕研究的同时发现,微生物发酵还具有降解生氰糖苷的作用,进而对亚麻饼粕微生物发酵脱毒工艺进行研究。具体取得的一些成果如下:(1)本实验通过单因素试验和Box-Behnken中心组合设计原理以及响应面分析法对微生物发酵提取亚麻木酚素的提取工艺进行优化,确定最佳工艺为接种量1.28%,含水量51.28%,发酵5.55天,木酚素提取率51.89mg/g,比未发酵的亚麻木酚素的得率高51.97%。(2)本实验采用正交试验法优选得出微生物发酵降解的最佳菌株为酿酒酵母,最佳发酵条件:接种量为3%,含水量为50%,发酵温度28℃,发酵时间72h。在最佳条件下进行验证实验测得生氰糖苷的脱除率为76.91%。(3)建立了SDG的超高效液相色谱(UPLC, Ultra Performance Liquid Chromatography)定量分析检测方法,优选了液相色谱条件:紫外检测器,检测波长:283nm,柱子:BEH C18(1.7um,100×2.1mm),流动相:A为0.1%磷酸水溶液,B为乙腈,进样量:2.5ul,流速为:0.208mL/min。经验证试验,表明该方法具有良好的稳定性、重现性和可靠性,并且对于SDG的峰有良好分离度。
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