【摘 要】
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生物矿化指的是生物体严格控制下形成无机矿物质的过程。仿生合成有机/无机复合材料不仅能帮助理解生物矿化机理,同时也能为制备生物矿化材料提供新思路,因此受到广泛关注。本
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生物矿化指的是生物体严格控制下形成无机矿物质的过程。仿生合成有机/无机复合材料不仅能帮助理解生物矿化机理,同时也能为制备生物矿化材料提供新思路,因此受到广泛关注。本研究在不同浓度的丝胶溶液中,利用化学沉淀法仿生合成丝胶/羟基磷灰石复合材料。用X射线粉末衍射仪(XRD)、傅立叶变换红外光谱仪(FTIR)、透射电子显微镜(TEM)、扫描电子显微镜(SEM)、原子力显微镜(AFM)等分析了复合材料的晶相组成、化学结构和微观形貌。最后,通过体外细胞培养评价了复合材料的生物相容性。
结果表明,以丝胶蛋白为有机基质调控生成了类牙釉状羟基磷灰石,并对其生长机理进行研究。TEM、SEM和AFM结果显示晶体是由直径大约10-20nm的纳米微晶聚集而成,当浓度较小为0.001%(w/v)时,纳米微晶聚集成长约70-100nm,宽约10-20nm的类牙釉状;当丝胶浓度到达1%(w/v)时,晶体尺寸长度超过200nm,宽度也达到了60-80nm;说明随着浓度的逐渐增大,晶体尺寸也随之增加。研究还发现,实验初始阶段,丝胶蛋白在搅拌作用下,自组装成亲水端向外的纳米小球,碱性环境使得小球带负电,能与羟基磷灰石微晶的晶面发生静电作用,从而阻断了在这些晶面发生的晶体一晶体间的融合,最后形成了类牙釉状的SS/HA复合颗粒。
本研究将不同浓度丝胶溶液调控所得SS/HA复合粉末和作为对照的纯羟基磷灰石粉末与MG-63细胞体外共同培养,研究复合材料的生物学性能。通过形态学观察,荧光染色观察以及MTT检测,与纯羟基磷灰石相比,丝胶与羟基磷灰石的复合材料更能促进MG-63细胞的增殖、生长,具有更好的生物活性,检测MG-63细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性以及细胞上清液中骨钙素(OC)含量,结果表明丝胶与羟基磷灰石复合材料更能促进细胞ALP活性的表达和诱导细胞分泌OC,使得MG-63细胞的成骨能力能到增强,是一种理想的复合生物材料。
上述结果表明,本研究以丝胶为有机基质调控羟基磷灰石的结晶生长,制得类牙釉状羟基磷灰石具有良好的生物相容性和生物活性。研究其生长机理,希望能为阐明蛋白质的生物矿化过程及其调控机理提供了理论依据,也可以为制备理想的复合生物材料提供新的思路。
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