四物汤抗辐射活性成分基于NF-kB通路的筛选及机制研究

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随着对核能源的开发及核技术在国防、工农业、医学等领域的广泛应用,环境中核污染日趋严重;来自宇宙和地球上的天然射线也影响着自然环境和人类健康;再加上现代通讯设备及技术的迅速发展,工作在广播站、通讯站和处于军用发射天线或雷达系统附近的工作人员和居民,接受的电磁辐射剂量也越来越大。因此,研究开发抗辐射药物,特别是天然新型低毒的辐射防护中草药研究倍受人们的关注。本实验通过TLR5-NF-κB通路筛选有效防辐射复方四物汤制剂的活性单体;利用细胞学和分子生物学实验方法对辐射所致淋巴母细胞损伤的分子机理及川芎嗪的干预作用进行讨论,得出以下结论:1.通过建立TLR5-NF-κB通路报告基因系统筛选四物汤有效成分,其中果糖、腺嘌呤、酸川芎嗪、叶酸、东莨菪内酯、β-谷甾醇能显著性激活HEK293细胞表面TLR5受体及其下游的NF-κB通路。2.2-8Gy60Coy照射导致淋巴母细胞AHH-1死亡,辐射早期以细胞凋亡为主要死亡方式,呈辐射剂量依赖性增加,且随着辐射时间的延长,照射剂量的增加,坏死细胞逐渐增多,细胞活力随之减低,DNA损伤程度也加剧。加入川芎嗪后能够增强辐射损伤淋巴母细胞的活力,说明川芎嗪具有一定的体外抗辐射活性。这种抑制凋亡的活性作用可能与凋亡相关因子Caspase-3/7活性的下降,促凋亡因子Bax、 Caspase-9mRNA表达的降低和凋亡抑制因子Bcl-2mRNA表达的升高,以及NF-κB核转位密切相关。总之,我们在TLR5-NF-κB通路报告基因筛选系统中,初步获得了四物汤中6种具有激活TLR5受体及其下游NF-κB通路的活性单体;川芎嗪体外防辐射作用与其抑制细胞凋亡和激活NF-κB信号通路有关。
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