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目的:采用杨梅素(Myricetin,Myric)与沉默围脂滴蛋白(Perilipin1,PLIN1)基因联合作用的方法,观察其对3T3-L1脂肪细胞脂解作用的影响,并进一步对其机制进行探究,为肥胖症的防治提供新的方向和思路。方法:1.常规培养及诱导分化3T3-L1前脂肪细胞。2.分别以0、1、5、10、50、100μmol/L的Myric浓度梯度以及48h和72h的时间梯度干预分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,测定细胞中TG和甘油含量。3.根据筛选出的Myric最佳干预浓度联合sh-RNA高效转染载体对已诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞进行联合干预实验,分为四组:联合干预组(Myric+sh-RNA)、转染组(sh-RNA)、杨梅素组(Myric)和空白组,测定细胞中TG和甘油含量,油红O染色,观察脂滴形态。4.联合干预后,采用Western blot检测PLIN1A、ATGL、HSL和p-HSL、ERK和p-ERK、MEK和p-MEK的表达量。采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测细胞中cAMP、PKA和p-PKC的含量。结果:1.Myric干预浓度为100μmol/L,干预时间为72h时,细胞内TG含量最低,甘油含量最高,差异有统计学意义(P<0.05)。2.联合干预后,Myric+sh-RNA组细胞内TG含量低于Myric组和sh-RNA组,甘油含量升高,差异有统计学意义(P<0.05);Myric+sh-RNA组细胞内脂滴数量明显减少、形态明显变小。3.联合干预后,Myric+sh-RNA组PLIN1A蛋白表达量低于Myric组和sh-RNA组,ATGL和HSL蛋白表达量高于Myric组和sh-RNA组,差异有统计学意义(P<0.05);Myric+sh-RNA组和Myric组p-HSL蛋白表达量高于sh-RNA组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。4.联合干预后,Myric+sh-RNA组和Myric组细胞内c AMP和PKA含量低于sh-RNA组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05);Myric+sh-RNA组和Myric组细胞内p-PKC含量,以及p-ERK/ERK、p-MEK/MEK的比值均大于sh-RNA组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.Myric最佳干预浓度为100μmol/L,干预时间为72h。2.Myric与沉默PLIN1联合作用可以更大程度地提高脂解效率。3.Myric与沉默PLIN1联合作用可更有效降低PLIN1表达量,提高ATGL与HSL的表达量。4.Myric促进脂解作用可能是通过激活PKC-MEK/ERK信号通路,增加该通路中p-HSL表达量来实现的;Myric同时可能对cAMP/PKA信号通路中相关因子的活性有一定的抑制作用。