目的应用连续照射的方法建立人结肠癌放射抗拒细胞株sw480-R,为研究人结肠癌放射抗拒的机制提供模型；检测放射抗性细胞株中CCND1、 CDK4的表达,为人结肠癌放射抗性的产生提供基础依据,初步探讨CCND1的表达与放射抗性的关系。方法1、用2Gy剂量的X射线照射人结肠癌sw480细胞株,每天1次,每周5d,分别照射不同周期后,按照细胞存活率筛选出放射抗拒细胞sw480-R,并检测细胞的倍增时间。2、以细胞克隆形成实验检测细胞的放射敏感性,MTT法检测照射后几个时间点的细胞存活分数,流式细胞仪检测细胞的细胞周期分布,并分别与亲代结肠癌细胞株进行比较。3、荧光定量PCR法检测放射抗性细胞株中CCND1、CDK4mRNA的表达,并与正常对照组相比较,探讨细胞放射抗性的形成机制。结论1、经2Gy照射3周的细胞仍有存活,可作为放射抗性细胞株模型。2、sw480-R细胞的倍增时间明显长于亲代sw480细胞,(P<0.05),sw480-R细胞放射抗拒性增加,照射后12h的存活率较sw480显著增高(98.40%vs92.81%,P<0.001)。3、流式细胞仪检测细胞周期显示sw480-R细胞周期的分布与sw480细胞不同,G0／G1期明显降低,G2／M期明显增高。4、实时荧光定量PCR显示,放射抗性细胞sw480-R中的CCND1、 CDK4的mRNA的表达量低于sw480细胞。