中国部分水牛线粒体D-环全序列多态性与系统发育关系研究

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本试验采用Sanger双脱氧链终止法测定了我国饲养的5个水牛品种(类群)22个个体的线粒体DNA控制区(D-loop)全序列,分析结果表明: 我国5个水牛品种(类群)22个个体中检测到5种长度变异类型,分别为:927bp、928 bp、929 bp、930 bp和931 bp,平均长度929.8 bp。T+A含量为58.6%,C+G含量为41.4%;共检测到70个变异位点,约占总分析位点的7.4%,其中单一信息位点9个(1%),简约信息位点43个(4.6%),缺失/插入18个(1.9%)。变异位点上存在转换、颠换、缺失/插入和转换与颠换共存五种变异类型,其中转换55次,颠换4次,缺失/插入2次,分别占总变异位点的90.2%、6.6%和3.3%;22个个体中共发现17种单倍型,没有一种单倍型是所有品种所共有的,其中单倍型H7出现的次数最多(4次),被德昌水牛和涪陵水牛所共有,另外有13种单倍型为相应品种(类群)所特有;5个水牛品种(类群)内平均单倍型多样度0.965±0.028,品种(类群)内平均核苷酸差异数为15.238,核苷酸多样度为1.651%。5个品种(类群)间核苷酸分歧度变化范围为0.638%—2.042%,其中云南水牛与涪陵水牛的核苷酸分歧度最小(0.638%),安徽水牛与德昌水牛的核苷酸分歧度最大(2.042%);品种(类群)间核苷酸净遗传距离范围为—0.580%—0.683%,平均核苷酸净遗传距离为—0.160%—0.528%,其中云南水牛与其它4个品种的平均核苷酸净遗传距离最大。品种(类群)间的Kimura双参数距离范围变异不大(0.006434—0.021146),其中安徽水牛与德昌水牛的Kimura双参数距离最大(0.021146),涪陵水牛与云南水牛的Kimura双参数距离最小(0.006434)其它各品种间的距离值都在0.013683—0.020414之间,差异较小。17种单倍型间的Jukes—Cantor距离变异范围为0.00108—0.04234,其中H9与H12的遗传距离最大(0.04234),H16与H17的遗传距离最小(0.00108),其它各单倍型间的遗传距离差异不大。表明我国饲养的水牛具有较丰富的遗传多样性。 应用本次试验所测定的水牛单倍型,并结合GenBank中相关序列的单倍型,采用Paup4.0和Mega2.1软件构建D-环全序列单倍型MP树和NJ树。MP树和NJ树都分成3大支,第一支为普通牛,第二支为江河型水牛,第三支包括我国沼泽型水牛和另一种沼泽型水牛(Carabaos),在沼泽型水牛分支下又明显得分为两类,其中H14、H16、H15和H17被聚为Ⅰ类,而H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、H11、H12、H13以及三个Carabaos个体聚为Ⅱ类。而在Ⅱ类下,MP树与NJ树的拓扑结构存在差异,在MP树下H11与H12被聚为一支,其分支统计置信度为100%,
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