【摘 要】
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第一章:ATP对血红蛋白作用的电化学研究ATP可导致血红蛋白的氧化还原反应发生变化。在pH7.0的MOPS缓冲溶液中,无氧条件下,在ATP作用下,血红蛋白的还原电位发生漂移,并与ATP浓度相
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第一章:ATP对血红蛋白作用的电化学研究ATP可导致血红蛋白的氧化还原反应发生变化。在pH7.0的MOPS缓冲溶液中,无氧条件下,在ATP作用下,血红蛋白的还原电位发生漂移,并与ATP浓度相关。当ATP的浓度低于3mM时,ATP能稳定还原态的血红蛋白;同时,R态血红蛋白的构像会因此而不稳定。而当ATP浓度从4mM变化到7mM时,血红蛋白氧化电位也发生了漂移。通过腺苷、AMP、ADP和2,3-DPG的对比实验,我们进一步探讨了血红蛋白的ATP效应。
第二章:抗坏血酸和多巴胺同时存在下的电化学分析通过对玻碳电极的电化学活化预处理,抗坏血酸和多巴胺的阳极峰能得到较好的分离,同时,抗坏血酸和多巴胺在电极上的响应也得到极大提高,因此,二者均能得到分析与测定。多巴胺在电极上是一个准可逆的反应,而抗坏血酸是一个完全不可逆的反应过程。利用这种电极反应的差异性,可以使多巴胺和抗坏血酸的氧化峰分离达到290mV。当S/N=3时,多巴胺的检测限为6.0×10-8M。这种处理过的电极非常稳定,4个星期内都有良好的响应。
第三章:黄嘌呤氧化酶与一氧化氮的相互作用利用TiO2包埋黄嘌呤氧化酶同时得到了蛋白FAD附基和Mo中心的直接电化学信号。FAD和Mo中心在电极上均发生了电子转移数为2的氧化还原反应。以此为基础,我们研究了一氧化氮(NO)和黄嘌呤氧化酶的相互作用。NO能被黄嘌呤氧化酶催化还原为HNO,并对蛋白的活性产生抑止。当NO浓度从1×10-5M增加到1×10-4M时,电极上活性蛋白量会减少;而当NO浓度高于1×10-4M时,由于NO将和HNO反应,缓和了HNO对黄嘌呤氧化酶的失活作用,电极表面活性蛋白量不再发生变化。
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