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本研究分别选择了13、15、18、20日鸡胚及1、7、14、21、35、56日龄雏鸡,每个时期取5只鸡的脾脏,制作冰冻切片,分别进行HE染色和免疫组化染色;同时在上述胚胎20日以后的各时期另取5只鸡胚或雏鸡的脾脏,分离淋巴细胞,进行淋巴细胞转化试验。利用HE染色方法观察鸡不同生长发育阶段脾脏的组织结构,结果表明:脾脏实质内的白髓与红髓在胚胎18日以后能辨认出来,4日龄雏鸡脾脏中形成明显可辨的动脉周围淋巴鞘,14日龄时才观察到脾小体。随着日龄的增长,脾脏的这些特征结构不断发育成熟:21日龄时,白髓和红髓的分界和比例达到稳定,此后脾小体继续变大,而且数目增多,35日龄和56日龄更为明显。利用免疫组织化学方法结合计算机图象分析技术研究不同生长发育阶段T淋巴细胞及其亚群在脾脏中的发育过程,结果表明,CD3~+T淋巴细胞从胚胎18日龄开始个别地出现在脾脏中,主要分布在动脉周围淋巴鞘和红髓中。随着日龄的增长,CD3阳性细胞的数量整体呈上升趋势,在21日龄时达到稳定。在4日龄前,CD3阳性细胞表面CD3分子蛋白表达量较少,说明4日龄前脾脏中的CD3~+T淋巴细胞还未成熟。CD4~+和CD8~+T细胞出现时间不同,CD8~+细胞出现较早,而且数量始终多于CD4~+细胞。随着日龄增长,二者数量整体呈上升趋势,都在21日龄时达到峰值,显著高于此前各日龄(P<0.05)。CD4~+和CD8~+细胞表面阳性分子蛋白表达量都在7日龄时达到稳定,说明7日龄脾脏中的CD4~+和CD8~+T淋巴细胞达到成熟水平。CD4~+细胞主要分布在动脉周围淋巴鞘中,而且脾小体中也存在CD4~+细胞,红髓中直到21日龄才明显观察到CD4~+细胞;CD8~+细胞在动脉周围淋巴鞘中和红髓中都有大量分布,但是脾小体中没有CD8~+细胞分布。CD4~+/CD8~+的比值基本维持在0.3-0.5之间。不同时期鸡脾脏淋巴细胞进行淋巴细胞转化实验,结果表明:鸡从4日龄起,脾脏中的T淋巴细胞开始具备与刀豆蛋白(ConA)进行反应并发生增殖的功能,同时发现4-7日龄脾脏淋巴细胞有很高的自身增殖活性。不同时期脾脏T淋巴细胞的ConA刺激指数总体呈上升趋势,说明脾脏中T淋巴细胞的细胞免疫功能随着年龄的增长而增强。研究发现:脾脏组织结构发育、T淋巴细胞发育和T淋巴细胞免疫功能发生三者之间存在密切的关系,T淋巴细胞的迁入会充实脾脏的组织结构如动脉周围淋巴鞘;脾脏的特殊组织结构又会为淋巴细胞行使功能活动提供场所;同样T淋巴细胞执行免疫功能时释放的细胞因子等物质又会刺激T、B淋巴细胞及其相关结构如动脉周围淋巴鞘、椭球和脾小体的发育成熟。所以三者之间相辅相成,缺一不可。本研究从组织水平、细胞水平和分子水平对鸡脾脏中T淋巴细胞的发育及其免疫功能的发生进行了研究,从而了解到鸡在胚胎期以及出壳初期的免疫状态,为禽类分子免疫学,病理生理学增添了内容,并为适时免疫、致病机理和疾病防治等研究提供了理论基础。