RNA结合蛋白Ptbp2在小鼠隐睾组织中的表达变化及其意义

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研究目的男性生殖细胞发育调节机制中,RNA结合蛋白多聚嘧啶序列结合蛋白2(Ptbp2)作为关键的选择性剪接因子已经普遍被认可。但是,它在隐睾睾丸组织中的表达水平及其作用依旧不清楚。此外,热应激抑制生殖细胞增殖和分化具有重要分子机制尚未明确。本研究拟通过手术方式,造腹腔内隐睾小鼠模型探讨Ptbp2表达水平的变化是否与热应激诱导睾丸生殖细胞损伤相关。研究方法取6周龄雄性ICR小鼠50只随机分成假手术(SO)组和单侧隐睾(UC)组。分别在术后第3、7、14、21、28天后颈椎离断处死,并获取睾丸组织和附睾组织。通过精液分析、HE染色观察两组小鼠生精细胞损伤变化,并运用Western blot法、免疫组化、QRT-PCR检测两组大鼠睾丸组织中Ptbp2及其调控的Pgk2 m RNA表达变化。研究结果精液分析和HE染色结果分别显示单侧隐睾(UC)组随着术后时间的增加,精子质量不断变差,生殖细胞严重受损,表现为非阻塞性无精子症,证实成功构建出小鼠隐睾模型。Western blot法和免疫组化显示Ptbp2在术后第7天显著降低,且从术后14天后几乎不表达。QRT-PCR结果显示Pgk2 m RNA表达水平在术后14天开始明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究结论在小鼠隐睾模型睾丸组织中,Ptbp2在受到腹腔热应激的影响下出现表达水平减少,从而导致生殖细胞转录子Pgk2 m RNA的稳定性下降,最终引起隐睾睾丸生精损伤。因此,Ptbp2在热应激诱导精子细胞损伤和非阻塞性无精子症中起重要作用。
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